miR-217调控TIMP3的表达对喉癌细胞生物学行为的影响

目的探讨miR-217调控金属肽酶抑制剂3(metallopeptidase inhibitor 3, TIMP3)的表达对喉癌细胞生物学行为的影响。方法选择喉癌并行喉部分切除术或喉全切除术的癌组织32例,同时取距离肿瘤2 cm的癌旁正常喉组织32例。选择人喉癌细胞株Hep2,并将miR-217 mimics、Control mimics转染至细胞,分别作为miR-217 mimics组与miR-217 NC组,再将TIMP3 3'-UTR野生型(Wt)质粒和TIMP3 3'-UTR突变型(Mut)质粒分别转染细胞。实时定量核酸扩增检测(qPCR)miR-217及TIMP3的表达水平,双荧光素酶实验检测验证miR-217与TIMP3在喉癌Hep2细胞株中的调控关系,MTT增殖实验检测细胞增殖数,Transwell检测细胞迁移、侵袭数,分析miR-217在喉癌组织中的表达与其临床特征的相关性。结果 qPCR检测结果显示,癌旁正常喉组织、喉癌组织的miR-217表达量分别为1.53±0.21、0.68±0.13,TIMP3表达量分别为1.18±0.15、0.31±0.08,比较差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-217 mimics+TIMP3 3'-UTR Wt组、miR-217 NC+TIMP3 3'-UTR Wt组、miR-217 mimics+TIMP3 3'-UTR Mut组、miR-217 NC+TIMP3 3'-UTR Mut组的荧光素酶活性分别为1.79±0.31、1.15±0.11、1.28±0.28、1.18±0.19,比较差异有统计学意义(t=12.09,P=0.019);miR-217 mimics+TIMP3 3'-UTR Wt组、miR-217 NC+TIMP3 3'-UTR Wt组双荧光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-217 NC组比较,miR-217 mimics组喉癌细胞增殖数、迁移细胞数及侵袭细胞数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-217表达与喉癌的病理分期及淋巴结有无转移相关(P<0.05)。结论 miR-217调控TIMP3表达以抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

Effects of miR-217 Regulation of TIMP3 expression on Biological Behavior of Laryngeal Carcinoma Cells

SONG Jian-tao;ZHAO Hai-jun;ZHENG Jian-jun;WANG Xiang-feng(Department of Otolaryngology Head and Neck Surgery, Weinan Central Hospital, Weinan, Shaanxi 714000, China)