| 新趋化因子VCC-1小干扰RNA真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 作者姓名： | 牟霞 陈瑶 王穗海 黄湘 李明 |
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| 作者单位： | 南方医科大学,生物技术学院,广州,510515;贵州省疾病预防控制中心;南方医科大学,生物技术学院,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的 构建对VCC-1基因有特异性抑制作用的小干扰RNA(siRNA)表达载体.方法 根据VCC-1 mRNA序列,按照siRNA设计原则设计4条特异性的寡核苷酸序列及阴性对照,分别克隆到pGPU6/GFP/Neo载体中.酶切鉴定和测序验证阳性克隆.用脂质体转染SMMC7721细胞,以RT-PCR分析其对VCC-1 mRNA表达的影响.结果 经酶切、测序鉴定均证实重组质粒构建成功.pGPU6/GFP/Neo-siRNA、B、C、D载体均能抑制SMMC7721细胞VCC-1基因mRNA的表达,其中重组质粒C抑制作用最强.结论 成功构建了靶向人VCC-1的小干扰RNA表达载体,为进一步研究VCC-1的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | VCC-1 小干扰RNA表达载体 SMMC7721细胞 RNA干扰 |
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