针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注后高迁移率族蛋白B1的影响

目的：探讨针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）后的保护作用以及对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响。方法选择60只Wistar大鼠，按随机数字表法分为假手术组、心肌I/R模型组、针灸预处理组，每组20只。采用结扎冠状动脉左室支左心耳下缘约0.5 cm处阻断血流10 min后再灌注1 h制备I/R损伤模型；假手术组仅穿线不结扎；针灸预处理组于I/R前7 d给予每日1次电针内关穴20 min，连续治疗7 d。采用苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察心肌组织病理学变化，半定量积分法计算3组心肌组织病理学评分；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的含量，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测心肌组织HMGB1、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平。结果光镜下可见心肌I/R模型组心肌纤维部分断裂，心肌细胞大片状坏死，边界不清，细胞出现浓缩、破裂、溶解、甚至消失，间质水肿并伴大量炎性细胞浸润；针灸预处理组上述表现较心肌I/R模型组明显减轻。与假手术组比较，心肌I/R模型组HMGB1、TNF-α、cTnT含量和组织病理学评分均明显升高〔HMGB1（μg/L）：9.64±1.16比2.15±.031，TNF-α（μg/L）：91±22比19±5， cTnT（μg/L）：1.50±0.35比0.07±0.03，组织病理学评分（分）：2.5±0.3比0.0±0.0，均P＜0.01〕，HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达均明显升高（HMGB1 mRNA：1.42±0.16比0.02±0.00，MCP-1 mRNA：0.46±0.06比0.01±0.00，TNF-αmRNA：0.75±0.04比0.03±0.00；HMGB1蛋白：1.08±0.01比0.02±0.01， MCP-1蛋白：0.92±0.03比0.40±0.01，TNF-α蛋白：1.10±0.02比0.35±0.01，P＜0.05或P＜0.01）；与心肌I/R模型组比较，针灸预处理组HMGB1（6.58±0.73）、TNF-α（63±19）、cTnT（1.15±0.31）含量均明显降低（均P＜0.01），HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达明显降低（mRNA表达分别为0.74±0.12、0.18±0.02、0.10±0.03，蛋白表达分别为0.40±0.01、0.36±0.02、0.50±0.02，均P＜0.05），组织病理学评分（1.2±1.0）明显降低（P＜0.01）。结论针灸预处理可减轻大鼠心肌I/R损伤，其机制可能与减轻HMGB1介导的晚期炎症反应有关。

Effects of electroacupuncture pretreatment on high mobility group box 1 expression after myocardial ischemia/reperfusion in rats