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人卵巢癌细胞系干/祖细胞分离及其鉴定
引用本文:王翠环,杜涌瑞,高燕,顾欣,赵惠丰,李宏钊,姚智,邓为民.人卵巢癌细胞系干/祖细胞分离及其鉴定[J].中华肿瘤防治杂志,2010,17(6).
作者姓名:王翠环  杜涌瑞  高燕  顾欣  赵惠丰  李宏钊  姚智  邓为民
作者单位:1. 天津医科大学基础医学院免疫学教研室,天津市细胞与分子免疫学重点实验室,天津,300070
2. 天津市中心妇产科医院,天津,300052
基金项目:国家自然科学基金(30670801); 天津市科学技术委员会资助项目(06YFJMJC08300)
摘    要:目的:自人卵巢癌细胞系SK-OV-3中分离干/祖细胞并进行鉴定。方法:采用无血清球形体形成法从SKOV-3中分离培养卵巢癌干/祖细胞;采用实时定量PCR和蛋折质印迹法测定球形体细胞干/祖细胞相关标志ABCG2、Oct-4、Nanog基因和蛋白的表达;流式细胞仪检测其耐药性;双层软琼脂检测其克隆形成能力;NOD/SCID小鼠检测其体内致瘤性。结果:球形体细胞表达干/祖细胞相关标志Oct-4、ABCG2、Nanog;对顺铂高耐药;在双层软琼脂上克隆形成率达(13.67±1.48)%;1 000个球形体形成细胞就能在NOD/SCID鼠中成瘤。结论:采用无血清培养基中球形体形成法从SKOV-3细胞系中可以分离出具有干/祖特性的卵巢癌细胞,可为今后研究卵巢癌的发生、发展、复发及其化疗药物筛选提供简便实用的体外模型。

关 键 词:卵巢癌  癌干/祖细胞  细胞系  分离鉴定  

Isolatian and identification of cancer stem/progenitor cells from human ovarian cancer cell line
WANG Cui-huan,DU Yong-rui,GAO Yan,GU Xin,ZHAO Hui-feng,LI Hong-zhao,YAO Zhi,DENG Wei-min.Isolatian and identification of cancer stem/progenitor cells from human ovarian cancer cell line[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2010,17(6).
Authors:WANG Cui-huan  DU Yong-rui  GAO Yan  GU Xin  ZHAO Hui-feng  LI Hong-zhao  YAO Zhi  DENG Wei-min
Institution:WANG+Cui-huan1,DU+Yong-rui2,GAO+Yan2,GU+Xin1,ZHAO+Hui-feng1,LI+Hong-zhao1,YAO+Zhi1,DENG+Wei-min11.Department+of+Immunology,Tianjin+Medical+University,Tianjin+Key+Laboratory+of+Cellular+,+Molecular+Immunology,Tianjin+300070,P.R.China2.Tianjin+Central+Hospitat+for+Obstetrics+,+Gynecology,Tianjin+300052,P.R.China
Abstract:OBJECTIVE: To isolate and identify the ovarian cancer stem/progenitor cells from human ovarian cancer cell line SKOV-3.METHODS: To isolate ovarian cancer stem/progenitor cells by sphere-forming in serum-free culture medium and to identify the stemness of this kind of cell from following aspects: 1) to determine the expression of genes and proteins of the stem/progenitor cell-relevant markers ABCG2,Oct-4,Nanog by Real-time PCR and Western blot respectively;2) to detect the drug resistance against cisplatin b...
Keywords:ovarian cancer  cancer stem/progenitor cells  cell line  
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