海马活化素βA亚基基因表达与神经元对抗兴奋性损害内源性保护效应的关系

背景：自从发现活化素可促进鸡视网膜神经细胞存活以来，活化素在神经系统的研究受到关注。近年发现，缺血、缺氧等多种脑损伤模型的海马组织活化素βA mRNA表达上调，但癫痫活动后活化素βA mRNA表达的变化有待研究。目的：观察小鼠毛果芸香碱(pilocarpine，PC)致惊后不同时间海马活化素βA mRNA的表达，探讨其作用机制。设计：以实验动物为研究对象，随机对照的实验研究。单位：一所大学医院的神经内科和一所大学神经病学研究所。材料：实验于2001-11／2002-07在复旦大学附属华山医院神经病学研究所及上海医学院病理室完成。选择8～10周龄健康雄性C57BL／6小鼠168只，体质量20～25g，由中国科学院上海实验动物中心提供。干预：实验组小鼠腹腔注射PC 350mg／k(10g／L)，并于注射PC前30min皮下注射东莨菪碱1mg／kg，以拮抗其外周胆碱能反应。注射PC后呈连续的肌阵挛或全身强直阵挛发作并持续1h为癫痫持续状态(status epilepticus，SE)模型鼠。成模后即刻腹腔注射安定(4mg／kg)终止发作，未成模鼠(NSE)于注射PC 1．5h后亦注射相同剂量的安定。对照组小鼠用生理盐水代替毛果芸香碱腹腔注射，余同实验组。SE鼠、NSE鼠及对照组鼠按致模后时间随机分为0，1，3，6，24，48h6小组，每小组6只(原位杂交分析中无NSE组及0h点)。主要观察指标：应用RT-PCR观察SE成模鼠与NSE鼠不同时间海马活化素βA mRNA的表达；应用原位杂交观察SE后不同时间小鼠海马活化素βA mRNA表达的分布。结果：NSE鼠与对照组鼠海马活化素βA mRNA的表达各时间点间无明显变化；SE开始时(0h)活化素βA mRNA(0．49&;#177;0．11)有一过性显著将低，至SE 1h时(0.73&;#177;0．12)迅速回升至对照水平(0.74&;#177;0．13).活化素βA mRNA继续增高，3h达(0.97&;#177;0．24)，6h达(1．34&;#177;0．19)，并维持至近24h(0．98&;#177;0．17)，此后于48h(0.83&;#177;0．09)下降至略高于对照水平。与对照组相比，3，6，24h增高有显著差异(t=2.668，6.289，2．916，P&;lt;0.001～0．05)。活化素βA mRNA表达明显上调的部位最早于SE后3h出现于海马CA2与DG区，6h后CA3区亦见明显表达，24h后仅CA2，CA3区有表达，48h后仅CA2区可见少量阳性细胞。结论：PC诱导的SE能明显上调海马活化素βA mRNA的表达，而NSE对之无明显上调作用；活化素βA mRNA表达的上调很可能是神经元对抗兴奋性损害的一种内源性保护效应。