人源性抗血小板膜糖蛋白IIb／IIIa Fab抗体的研制及其对血小板聚集功能的影响

目的：构建人源性抗血小板膜糖蛋白IIb／IIIa（GPIIb／IIIa）Fab噬菌体抗体库，筛选抗GPIIb／IIIa特异性的噬菌体抗体，并对其功能进行研究。方法：取血小板膜糖蛋白抗体（抗GPIIb／IIIa）阳性的特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者脾细胞，采用噬菌体抗体库技术构建人源性抗GPIIb／IIIa Fab噬菌体抗体库，以表达GPIIb／IIIa的CHO123细胞筛选抗体库，并以ELISA法检测噬菌体抗体；用Western blot对抗体进行鉴定，并测定其与血小板抗原的结合；观察筛选到Fab抗体对血小板聚集的影响。结果：筛选出2株能够与血小板膜GPIIb／IIIa特异性结合的Fab抗体，其序列与人免疫球蛋白轻、重链可变区序列具有高度同源性，表达纯化的Fab抗体能抑制血小板聚集。结论：成功地从人源性抗血小板膜糖蛋白IIb／IIIa Fab抗体库筛选出特异性识别GPIIb／IIIa，具有抑制血小板聚集作用的人源性抗体。