| 热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化 |
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| 引用本文： | 张天一,牛纪晓,周欣阳,林琳,顾君一. 热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化[J]. 中国免疫学杂志, 2005, 21(9): 690-693 |
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| 作者姓名： | 张天一 牛纪晓 周欣阳 林琳 顾君一 |
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| 作者单位： | 1. 南通大学神经再生重点实验室分析细胞学研究室,南通,226001
2. 协和医科大学基础学院 |
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| 基金项目： | 本课题受江苏省教育厅基金（03KJD320183）资助. |
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| 摘 要： | 目的：建立从比肝癌细胞中提取、纯化热休克蛋白gp96-肽复合物的方法。方法：①制备H22肝癌细胞蛋白：将H22盘肝癌细胞裂解、离心、过滤及透析后获得。②gp96-肽复合物的纯化：上述可溶性H22肝癌细胞蛋白经分级硫酸铵盐析后，依次用ConA-Sepharose亲和层析、Sephadex G25更换缓冲液及DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化。③gp96-肽复合物的鉴定和浓度测定：所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子量及性质鉴定，Lowry法测定蛋白浓度。结果：分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染鉴定为单一带，分子量为96kD；Western blot结果证实为HSP gp96。每20ml压积H22细胞最终获得1mg的HSP gp6。结论：使用本分离纯化方法可获得高纯度HSP gp96肽复合物。
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| 关 键 词： | HSP gp96-肽复合物 纯化 H22肝癌 小鼠 |
| 文章编号： | 0000-484X（2005）09-0690-04 |
| 收稿时间： | 2004-04-30 |
| 修稿时间： | 2004-04-30 |
The purification of hot shock protein gp96-peptide complexes |
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| ZHANG Tian-Yi,NIU Ji-Xiao,ZHOU Xin-Yang,LIN Lin,GU Jun-Yi. The purification of hot shock protein gp96-peptide complexes[J]. Chinese Journal of Immunology, 2005, 21(9): 690-693 |
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| Authors: | ZHANG Tian-Yi NIU Ji-Xiao ZHOU Xin-Yang LIN Lin GU Jun-Yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gp96-pepfide complexes Purification H22 hepatoma Mice |
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