| 土壤中腈水解酶产生菌的快速筛选 |
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| 引用本文： | 周冬杰,欧阳立明,许建和,周鹏鹏,潘江. 土壤中腈水解酶产生菌的快速筛选[J]. 医学教育探索, 2009, 0(4): 455-548 |
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| 作者姓名： | 周冬杰 欧阳立明 许建和 周鹏鹏 潘江 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，生物催化研究室;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，生物催化研究室;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，生物催化研究室;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，生物催化研究室;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，生物催化研究室 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金（07ZR14030） |
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| 摘 要： | 为了从土壤中快速筛选具有腈水解能力的微生物，建立了以苯酚次氯酸盐比色法（又名Berthelot比色法）检测96孔板反应产物中氨离子浓度为基础的腈水解酶酶活快速分析方法。用该法从土壤样本中筛选获得了9个酶活力较高的菌株。用HPLC方法定量检测9个菌株对对羟基苯甲腈的转化率，证明苯酚次氯酸盐比色法微孔板分光光度计的测定结果与HPLC结果对应良好，转化率最高为49.9%。经16s rDNA鉴定，菌株分别属于金黄杆菌属、芽胞杆菌属、葡萄球菌属、寡养单胞菌属等。
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| 关 键 词： | 腈水解酶； 苯酚次氯酸盐比色法（Berthelot比色法）； 微孔板； 筛选 |
| 收稿时间： | 2008-10-17 |
Rapid Screening of Nitrilase Producing Strains from Soil |
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| Abstract: | To isolate nitrilase producing strains from soil, a rapid enzyme activity analysis method based on phenol hypochlorite colorimetry (Berthelot colorimetry) for the determination of ammonia was established. Using this method, 9 strains with relatively high nitrilase activity were obtained. The p hydroxybenzonitride conversion rate of the 9 strains were also quantitatively determined by HPLC and the results of the two methods corresponded well. The highest conversion rate of one of the 9 strains was 49.9%. 16s rDNA sequence analysis showed that the 9 strains belong to genus of Chryseobacterium, Bacillus, Staphylococcus, Stenotrophomonas etc. |
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| Keywords: | nitrilase phenol hypochlorite colorimetry (Berthelot colorimetry) micro plate screening |
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