| 日本血吸虫磷酸甘油酸激酶基因T/A克隆及序列分析 |
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| 引用本文： | 梁瑜,肖建华,廖力,伍和平,张愉快,刘传爱,杨秋林.日本血吸虫磷酸甘油酸激酶基因T/A克隆及序列分析[J].中国病原生物学杂志,2005,18(3):203-205. |
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| 作者姓名： | 梁瑜 肖建华 廖力 伍和平 张愉快 刘传爱 杨秋林 |
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| 作者单位： | 南华大学医学院寄生虫学教研室,湖南,衡阳,421001 |
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| 基金项目： | 湖南省教育厅资助项目(No.402JY02C392)。 |
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| 摘 要： | 目的获取日本血吸虫磷酸甘油酸激酶(SjPGK)编码基因片段,分析其核苷酸序列,为日本血吸虫病疫苗研制提供候选抗原分子。方法根据曼氏血吸虫磷酸甘油酸激酶(SmPGK)cDNA序列设计1对引物,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,从日本血吸虫成虫总RNA中扩增SjPGK基因片段。利用T/A克隆法,将其克隆入pMD18T载体,经双酶切分析和PCR鉴定,将阳性克隆进行脱氧核糖核酸序列测定;运用Blast程序,将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与NCBI数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较。结果RTPCR特异性扩增出1条长约830bp大小的条带;经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pMD18TSjPGK中含有所扩增的基因序列;脱氧核糖核酸序列测定和分析,SjPGK基因片段长为830bp,与SmPGK的核苷酸同源性为85%,分值为672;氨基酸同源性为94%,分值为473。结论成功克隆SjPGK编码基因片段,为进一步实验提供了条件。
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| 关 键 词： | 血吸虫 日本 磷酸甘油酸激酶 T/A克隆 序列分析 RT-PCR |
| 文章编号： | 1001-6627(2005)03-0203-03 |
| 修稿时间： | 2004年6月30日 |
T/A CLONING AND SEQUENCE ANALYSIS OF PHOSPHOGLYCERATE KINASE GENE OF SCHISTOSOMA JAPONICUM |
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| LIANG Yu,XIAO Jian-hua,Liao Li,WU He-ping,ZHANG Yu-kuai,LIU Chuan-ai,YANG Qiu-lin.T/A CLONING AND SEQUENCE ANALYSIS OF PHOSPHOGLYCERATE KINASE GENE OF SCHISTOSOMA JAPONICUM[J].Journal of Pathogen Biology,2005,18(3):203-205. |
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| Authors: | LIANG Yu XIAO Jian-hua Liao Li WU He-ping ZHANG Yu-kuai LIU Chuan-ai YANG Qiu-lin |
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