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刚地弓形虫P30两个不同片段的克隆、表达及鉴定
引用本文:褚宏亮,姚永伟,芦王英,刘剑南,陈玲,侯敏,章子豪,张耀娟. 刚地弓形虫P30两个不同片段的克隆、表达及鉴定[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2004, 24(3): 275-279
作者姓名:褚宏亮  姚永伟  芦王英  刘剑南  陈玲  侯敏  章子豪  张耀娟
作者单位:南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学病原生物学教研室,江苏,南京,210029
基金项目:江苏省2003年血地寄防应用性科学课题(X200331)
摘    要:目的:构建刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因的2个不同片段的克隆并进行表达、鉴定。方法:根据已发表的弓形虫P30基因序列,参考有关文献设计合成两对引物,用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段,分别构建T-A克隆,经PCR扩增及酶切鉴定后,进行测序,再亚克隆入pMAL—p2质粒并转化DH5α感受态细胞,于氨苄青霉素LB平板上初步筛选阳性克隆,再经酶切及PCR扩增鉴定重组子。将重组子转入表达菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并对所表达的蛋白以western blot鉴定,结果:成功构建相应的T-A克隆及pMAL—p2亚克隆,经诱导、表达和鉴定,证实2个表达产物均为目的蛋白,其分子量分别为70和73Ku。结论:成功获得弓形虫主要表面抗原P30的2个表达产物,为其进一步的纯化及应用奠定了基础。

关 键 词:刚地弓形虫  P30  克隆  表达
文章编号:1007-4368(2004)03-0275-05
修稿时间:2003-09-09

Clone,Expression and Identification of Two Different Fragments of the Major Surface Antigen P30 Derived From Toxoplasma Gondii
CHU Hong-liang,YAO Yong-wei,LU Wang-ying,Liu Jian-nan,CHEN Ling,HOU Min,ZHANG Zi-hao,ZHANG Yao-juan. Clone,Expression and Identification of Two Different Fragments of the Major Surface Antigen P30 Derived From Toxoplasma Gondii[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2004, 24(3): 275-279
Authors:CHU Hong-liang  YAO Yong-wei  LU Wang-ying  Liu Jian-nan  CHEN Ling  HOU Min  ZHANG Zi-hao  ZHANG Yao-juan
Abstract:
Keywords:toxoplasma gondii  P30  clone  expression
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