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免疫捕获PCR法快速检测大肠埃希氏O157∶H7的研究
引用本文:牛建军,黄建炜,李莉,彭宣宪.免疫捕获PCR法快速检测大肠埃希氏O157∶H7的研究[J].中国人兽共患病杂志,2004,20(10):897-900.
作者姓名:牛建军  黄建炜  李莉  彭宣宪
作者单位:厦门市疾病预防控制中心,厦门市疾病预防控制中心,厦门市疾病预防控制中心,厦门大学生命科学学院 厦门361004 ,厦门361004 ,厦门361004
摘    要:目的建立两种免疫捕获PCR法快速检测E.coliO157∶H7,并探讨其灵敏度和特异性。方法运用免疫磁珠集菌(IMS)和抗体包被扩增管(mACT)两种方法富集待测样品中E.coliO157∶H7,再应用巢式PCR法检测编码E.coliO157∶H7O抗原的rfbE基因,对13株E.coliO157菌和10株非E.coliO157菌进行检测。结果应用两种icPCR检测,所有E.coliO157∶H7和E.coliO157NM菌株均为阳性结果,而其它包括与O157抗血清能交叉凝集的菌株检测结果均为阴性;对于含有48×102cfu/ml以上浓度的E.coliO157∶H7菌悬液,两种方法,所有试验管都能检测到特异性扩增;并证实了这两种方法可用于检测鲜牛奶中E.coliO157∶H7,样品中E.coliO157∶H7的含量只要不少于101cfu/ml,经过6小时增菌均能检测出来。结论IMS-icPCR和mACT-icPCR用于检测E.coliO157∶H7,是快速、灵敏且高特异的方法。

关 键 词:快速微生物检测  免疫捕获PCR  病原菌  
文章编号:1002-2694(2004)10-0897-03
收稿时间:2004-10-20
修稿时间:2004年4月17日
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