| 小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导培养及功能分析 |
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| 引用本文： | 王宏伟,陆江阳,覃家剑,康佳蕊,杨雯.小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导培养及功能分析[J].感染、炎症、修复,2014(4):199-203. |
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| 作者姓名： | 王宏伟 陆江阳 覃家剑 康佳蕊 杨雯 |
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| 作者单位： | 解放军总医院第一附属医院病理科,北京,100048 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，首都卫生发展科研专项基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)体外培养和扩增方法,为以DCs为靶点的免疫治疗研究提供基础。方法:从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中提取骨髓细胞,以含重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,400U/ml)和IL-4(200U/ml)的RPMI 1640(含10%FBS)进行诱导培养,于培养第4天加入脂多糖(LPS)继续培养2d。利用倒置相差显微镜和透射电子显微镜观察细胞生长状态和超微结构,流式细胞术鉴定培养第6天时DCs纯度及免疫表型,流式细胞微球捕获芯片技术检测第2、4、6天培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、巨噬细胞趋化因子-1(MCP-1)、干扰素-1(IFN-1)、TNF-α、IL-12p70含量。结果:重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠骨髓细胞4d,加入脂多糖(LPS)继续培养2d,近90%细胞高表达DCs特征性标志物CD11c,高表达抗原提呈分子MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的树突状形态学特征和分泌炎症性细胞因子IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和IL-12p70的功能。结论:小鼠骨髓细胞以重组小鼠GM-CSF和IL-4体外诱导培养的DCs具有较高的纯度,保持了体内的形态学、免疫表型及功能特征。
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| 关 键 词： | 骨髓 树突状细胞 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素-4 |
In vitro culture of bone marrow-derived dendritic cells of mouse and a study of their function |
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| Wang Hongwei;Lu Jiangyang;Qin Jiajian;Kang Jiarui;Yang Wen.In vitro culture of bone marrow-derived dendritic cells of mouse and a study of their function[J].Infection Inflammation Repair,2014(4):199-203. |
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| Authors: | Wang Hongwei;Lu Jiangyang;Qin Jiajian;Kang Jiarui;Yang Wen |
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| Institution: | Wang Hongwei;Lu Jiangyang;Qin Jiajian;Kang Jiarui;Yang Wen;Department of Pathology,The First Hospital Affiliated to the Chinese PLA General Hospital; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bone marrow Dendritic cells Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Interleukin-4 |
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