| 检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 童铁钢,白宇,张维军,王群,刘光亮,徐树兰,吴东来.检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(4). |
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| 作者姓名： | 童铁钢 白宇 张维军 王群 刘光亮 徐树兰 吴东来 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，黑龙江省自然科学基金重点项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleukin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法.方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA.结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4 mg/L,检测抗体的工作效价为1:2 000.建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15 ng/L,特异性良好. 结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18 ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础.
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| 关 键 词： | 马白细胞介素-18 单克隆抗体 夹心ELISA |
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