| PI3K-AKT通路对脑缺血损伤神经干细胞的增殖作用 |
| |
| 引用本文： | 崔晓萍,陈建梅,穆军山,叶建新,林 敏,赵文龙,翁 婧,林 航. PI3K-AKT通路对脑缺血损伤神经干细胞的增殖作用[J]. 中国康复医学杂志, 2016, 0(2): 154-159 |
| |
| 作者姓名： | 崔晓萍 陈建梅 穆军山 叶建新 林 敏 赵文龙 翁 婧 林 航 |
| |
| 作者单位： | 福建医科大学附属教学医院南京军区福州总医院神经内科，福州，350025 |
| |
| 基金项目： | 南京军区医药卫生科研基金（12MA100） |
| |
| 摘 要： | 目的:利用低氧干预分离的小鼠神经干细胞,通过构建腺病毒载体将腺病毒5-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3(Ad5-AKT3)基因和丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3小干扰RNA(AKT3 si RNA)干扰转染至缺血神经干细胞,探索磷酸肌醇三磷酸激酶-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K-AKT)通路对缺血性神经干细胞的增殖作用。方法:取新生24h昆明小鼠海马,分离培养原代神经干细胞,并采用巢蛋白(Nestin)免疫荧光检测和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)渗入实验对其进行鉴定;将所培养的传代神经干细胞随机分组:正常组、缺血模型组、低氧组(低氧+缺血模型组)、Lip2000组(低氧+缺血模型组+Lip2000空转染组)、AKT转染组(低氧+缺血模型组+Ad5-AKT3转染组)、AKT干扰组(低氧+缺血模型组+Lip2000+AKT3 si RNA干扰组)。建立脑缺血损伤的体外模型,低氧干预,构建腺病毒Ad5-AKT3载体和AKT3 si RNA后,各组行MTT检测;RT-q PCR检测AKT3 m RNA表达情况;Werstern Blot检测PI3K、AKT3、PCNA。结果:通过免疫荧光检测Nestin鉴定神经干细胞球,在荧光显微镜下观察到绿色明亮且典型的细胞球,球内可见清晰结构;渗入Brdu免疫荧光检测可见整个着色细胞球。MTT OD值和RT-q PCR检测AKT3 m RNA均显示,与正常组相比,模型组和AKT干扰组下降(P0.05),其余各组均升高(P0.05),其中低氧组和Lip2000组之间无明显差异(P0.05)。与模型组相比,除AKT干扰组下降外(P0.05),其余各组均升高(P0.05)。Western Blot检测PI3K、AKT3、PCNA蛋白表达与正常组相比,模型组和AKT干扰组表达量减少(P0.05),低氧组、Lip2000组和AKT转染组均增加(P0.05),其中AKT转染组差异最明显(P0.01)。结论:PI3K-AKT信号通路在低氧干预下有效促进神经干细胞的增殖过程。
|
| 关 键 词： | PI3K-AKT信号通路；神经干细胞；腺病毒AKT载体；AKT干扰 |
| 收稿时间： | 2014-10-23 |
The role of PI3K-AKT pathway in proliferation of neural stem cell after cerebral ischemia injury |
| |
| Affiliation: | Department of Neurology, Fuzhou General Hospital of Nanjing Army Command, Clinical Medical College of Fujian Medical University, Fuzhou, 350025 |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | PI3K - AKT pathway neural stem cells adenovirus AKT carrier AKT interference |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国康复医学杂志》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国康复医学杂志》下载全文 |
|
