| 实时RT-PCR基因表达相对定量REST(C)软件分析与2(-△△CT)法比较 |
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| 引用本文： | 庾蕾,刘建平,庄志雄,杨淋清,张仁利,叶小明,程锦泉.实时RT-PCR基因表达相对定量REST(C)软件分析与2(-△△CT)法比较[J].热带医学杂志,2007,7(10). |
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| 作者姓名： | 庾蕾 刘建平 庄志雄 杨淋清 张仁利 叶小明 程锦泉 |
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| 摘 要： | 目的 利用实时RT-PCR技术建立一种简便、准确的基因表达相对定量方法.方法 以正常的人支气管上皮细胞株(16HBE)cDNA为模板5倍系列稀释,分别作DNA聚合酶K(POLK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因标准曲线.以不同剂量反式二羟环氧笨并芘(anti-BPDE)诱导的16HBE、anti-BPDE转化的16HBE及肺癌细胞株(H1299)cDNA为模板,进行实时定量RT-PCR.以GAPDH基因作为内参照.进行POLK基因表达相对定量.实验数据分别采用2(-△△CT)法及REST(C)软件分析.结果 5倍系列稀释法制作的标准曲线,呈现较好的线型关系(Rsq 0.997).POLK及GAPDH基因扩增效率分别为117.5%和103.5%.采用2(-△△CT)法计算出的表达比值均比REST(C)软件分析高.结论 实时RT-PCR技术结合REST(C)软件分析是一种简便、准确的基因表达相对定量分析手段.
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| 关 键 词： | 实时RT-PCR 相对定量 标准曲线 基因表达 |
Quantitative Analysis of Real-Time PCR Expression Production by REST(C) and 2(-△△CT) |
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| YU Lei,LIU Jian-ping,ZHUANG Zhi-xiong,YANG Lin-qing,ZHANG Ren-li,YE Xiao-ming,CHENG Jin-quan.Quantitative Analysis of Real-Time PCR Expression Production by REST(C) and 2(-△△CT)[J].Journal Of Tropical Medicine,2007,7(10). |
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| Authors: | YU Lei LIU Jian-ping ZHUANG Zhi-xiong YANG Lin-qing ZHANG Ren-li YE Xiao-ming CHENG Jin-quan |
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