miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

目的:探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对于Twistl的调节。方法:本实验利用生物信息学方法预测Twistl的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twistl的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twistl的3'UTR调节其表达。结果:1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twistl的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引人miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twistl的3'UTR。结论:miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twistl的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。