| 脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 常会波,刘云,吴建新,徐琪寿. 脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达[J]. 军事医学科学院院刊, 2004, 28(4): 326-328,332 |
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| 作者姓名： | 常会波 刘云 吴建新 徐琪寿 |
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| 作者单位： | 1. 首都儿科研究所生化实验室,北京,100020
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助 ( 3 0 3 0 0 0 10) |
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| 摘 要： | 目的 :克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB ,并测定其生物学活性。方法 :根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物 ,利用PCR技术扩增得到aroB基因 ,将其克隆入pGEM Teasy载体中 ,以双脱氧法进行测序 ,然后再克隆入高效原核表达载体pBV2 2 0 ,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达 ,并测酶的生物活性。结果 :构建了aroB基因的克隆和表达重组子 ,经SD序列调节后 ,aroB基因获得高效表达 ,SDS PAGE图谱显示新增 38.8× 10 3 蛋白带 ,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为 5 .4。结论 :实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达 ,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础。
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| 关 键 词： | 脱氢奎尼酸合成酶 aroB基因 大肠杆菌 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-5501(2004)04-0326-04 |
Cloning and expression of aroB gene encoding dehydroquinate synthase in Escherichia coli |
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| CHANG Hui-Bo,LIU Yun,WU Jian-Xin,XU Qi-Shou. Cloning and expression of aroB gene encoding dehydroquinate synthase in Escherichia coli[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2004, 28(4): 326-328,332 |
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| Authors: | CHANG Hui-Bo LIU Yun WU Jian-Xin XU Qi-Shou |
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| Affiliation: | CHANG Hui-Bo2,LIU Yun1,WU Jian-Xin2,XU Qi-Shou 1* |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dehydroquinate synthase aroB gene Escherichia coli gene expression |
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