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结核分支杆菌icl基因克隆策略及表达研究
引用本文:裴秀英 郝方 张雪莲. 结核分支杆菌icl基因克隆策略及表达研究[J]. 宁夏医科大学学报, 2004, 26(6): 391-393
作者姓名:裴秀英 郝方 张雪莲
作者单位:宁夏医学院生物化学与分子生物学教研室,银川,750004;复旦大学遗传所,上海,200433
基金项目:宁夏教育厅科研项目资助 ( 2 0 0 3 )
摘    要:目的 研究克隆并表达结核分支杆菌H37Rv结构基因icl的最佳策略,并获得纯化蛋白。方法 以M.tb H37Rv基因组为模板,扩增该菌株的异柠檬酸酶基因icl,并重组入pUC18质粒进行克隆,克隆基因进而重组入原核表达质粒pET28-a( )中,在不同的条件下进行诱导表达。重组蛋白以Ni-NTA agaroae亲和层析柱纯化。结果 在25℃,0.25mM IPTG诱导表达8h可获得最佳表达量的可溶性重组蛋白,经HPLC和质谱检测分子质量为目标蛋白。结论 本研究中所采用的icl基因克隆表达策略能够获得正确的高表达的可溶性异柠檬酸酶重组蛋白。

关 键 词:结核分支杆菌  克隆基因  icl
文章编号:1005-8486(2004)06-0391-03
修稿时间:2004-06-22

Cloning and Expression of Isocitrate Lyase in Mycobacterium Tuberculosis
PEI Xiu-ying ,HAO Fang ,ZHANG Xue-lian. Cloning and Expression of Isocitrate Lyase in Mycobacterium Tuberculosis[J]. Journal of Ningxia Medical College, 2004, 26(6): 391-393
Authors:PEI Xiu-ying   HAO Fang   ZHANG Xue-lian
Affiliation:PEI Xiu-ying 1,HAO Fang 1,ZHANG Xue-lian 2
Abstract:
Keywords:mycobacterium tuberculosis  gene  icl
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