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胸腺素α1重组原核表达质粒的克隆及诱导表达
引用本文:彭仕芳,傅蕾,谭德明,苏先狮.胸腺素α1重组原核表达质粒的克隆及诱导表达[J].中国医师杂志,2007,9(9):1190-1192.
作者姓名:彭仕芳  傅蕾  谭德明  苏先狮
作者单位:1. 中南大学湘雅医院感染病科,湖南,长沙,410008
2. 中南大学,湘雅二医院感染病科
摘    要:目的:构建胸腺素α1(Tα1)基因的原核表达质粒,并诱导表达。方法:根据Tα1的DNA序列设计引物,采用PCR法扩增Tα1的cDNA,将其克隆入T-vector,形成中介重组体pT—Tα1,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-3X,构建重组质粒pGEX-3X-Tα1,用内切酶酶切鉴定及DNA测序分析;将pGEX-3X-Tα1转入大肠杆菌,用RT-PCR方法检测宿主菌中Tα1mRNA,经IPTG诱导,用SDS—PAGE检测有无相应大小的Tα1融合蛋白表达。结果:经DNA测序和SDS—PAGE法鉴定,成功构建了Tα1重组质粒基因工程菌,表达和纯化了具有Tα1融合蛋白。结论:构建的Tα1重组质粒基因工程菌,表达和纯化了具有Tα1融合蛋白,为今后的研究打下了基础。

关 键 词:胸腺素/遗传学  质粒
收稿时间:2007-04-27

Cloning and expression of the thymosin α1 recombinant procaryotic plasmid
PENG Shi-fang,FU Lei,TAN De-ming,SU Xian-shi.Cloning and expression of the thymosin α1 recombinant procaryotic plasmid[J].Journal of Chinese Physician,2007,9(9):1190-1192.
Authors:PENG Shi-fang  FU Lei  TAN De-ming  SU Xian-shi
Institution:Department of Infectious Diseases, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008, China
Abstract:
Keywords:Thymosin/genetics  Plasmids
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