| 串联siRNA干扰沉默结肠癌SW480细胞APRIL基因表达 |
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| 引用本文： | 卢美红,李海泉,汪桂华,王敬春,丁伟峰,王惠民.串联siRNA干扰沉默结肠癌SW480细胞APRIL基因表达[J].中华微生物学和免疫学杂志,2012,32(7):629-633. |
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| 作者姓名： | 卢美红 李海泉 汪桂华 王敬春 丁伟峰 王惠民 |
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| 作者单位： | 1. 226001,南通大学附属医院检验科
2. 226007,南通大学检验医学研究所 |
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| 基金项目： | 江苏省医学重点学科项目 |
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| 摘 要： | 目的 检测串联siRNA对SW480细胞中增殖诱导配体(APRIL)基因的影响.方法 设计并筛选针对APRIL基因的4条shRNA片段(sh644、sh1451、sh1938、sh2231),分别将其连接至pGenesil-1.1质粒表达载体,形成pGsh644、pGsh1451、pGsh1938、pGsh2231单一表达载体,同时将4条shRNA连接至pGenesil4-T质粒形成pG4串联siRNA表达载体.阳离子脂质体法转染至结直肠癌细胞株SW480.实时荧光定量PCR和Western blot技术检测SW480细胞中APRIL mRNA和蛋白表达水平.结果 经酶切和测序鉴定,构建的串联siRNA质粒载体符合要求.几条siRNA均可有效抑制SW480细胞APRIL基因的表达,APRIL mRNA的抑制率分别是pGsh644(56.2％)、pGsh1451(49.5％)、pGsh1938 (50.9％)、pGsh2231 (49.2％)、pG4(79.3％).蛋白质表达抑制率分别为pGsh644(56.9％)、pGsh1451(48.7％)、pGsh1938(50.1％)、pGsh2231 (46.4％)、pG4 (87.5％) (P＜0.05).其中以pG4抑制效应最强.结论 与传统单一的siRNA表达载体相比,串联siRNA表达载体大大地敲低了结直肠癌细胞株中APRIL基因的表达,为针对结直肠癌APRIL基因的基因治疗提供研究基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 串联siRNA 增殖诱导配体 结直肠癌 |
Depressive effect of multiple-siRNA-APRIL in SW480 cell |
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| LU Mei-hong
,
LI Hai-quan
,
WANG Gui-hua
,
WANG Jing-chun
,
DING Wei-feng
,
WANG Hui-min.Depressive effect of multiple-siRNA-APRIL in SW480 cell[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2012,32(7):629-633. |
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| Authors: | LU Mei-hong LI Hai-quan WANG Gui-hua WANG Jing-chun DING Wei-feng WANG Hui-min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference (RNAi) Multiple siRNA A proliferation-inducing ligand Colon carcinoma |
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