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原位分子杂交检测HFRSVRNA方法研究
引用本文:
朱进,张云,唐家琪,李先富,吴光华,张家驹,周燕萍.原位分子杂交检测HFRSVRNA方法研究[J].中国公共卫生学报,1997(4).
作者姓名:
朱进
张云
唐家琪
李先富
吴光华
张家驹
周燕萍
作者单位:
南京军区军事医学研究所,陕西省卫生防疫站
摘 要:
采用非放射性标记物-地高辛碱性磷酸酶标记肾综合征出血热病毒(HFRSV)cDNA制备分子探针,检测HFRSV在鼠肺、恙螨体内分布定位,并对原位分子杂交的各环节进行探讨。结果表明:鼠肺的吞噬细胞、支气管粘膜上皮细胞、血管内皮细胞等均见有阳性颗粒,在恙螨卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞也存在阳性颗粒;在前处理中,明胶硫酸铬钾与多聚赖氨酸的铺片效果相似;室温2h,42℃1h,4%多聚甲醛处理冰冻切片,可有效防止脱片,且保持良好的细胞形态结构;探针PCR标记法优于随机引物标记法;预杂交液加入spermDNA和yeasttRNA,不用硫酸萄聚糖,可有效地减少背景染色;42℃杂交16h,显色7h可得到理想结果
关 键 词:
原位分子杂交
肾综合征出血热病毒
恙螨
鼠肺
Study on Methods of HFRSV RNA Detection by in Situ Hybridization
Authors:
Zhu Jin
Institution:
Nanjing 210002
Abstract:
Keywords:
In situ hybridization\ Hemorrhagic fever with renal syndrome virus\ Chigger mite\ Mouse lung
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