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丁酸钠诱导MCF-7细胞凋亡反义cDNA文库的构建和初步鉴定
引用本文:奚玲,陈刚,吴鹏,王蓓蓓,周剑锋,马丁.丁酸钠诱导MCF-7细胞凋亡反义cDNA文库的构建和初步鉴定[J].中华实验外科杂志,2006,23(7):807-809.
作者姓名:奚玲  陈刚  吴鹏  王蓓蓓  周剑锋  马丁
作者单位:430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
基金项目:国家重点基础研究发展计划资助项目(2002CB513100):国家自然科学基金资助项目(30371657)
摘    要:目的构建丁酸钠诱导McF-7细胞凋亡过程的反义cDNA文库,以分离丁酸钠抗肿瘤效应基因。方法收集经2.5mmol/L丁酸钠处理0、12、18、24、36、48、72h的人乳腺癌MCF-7细胞,提取poly(A)+RNA,逆转录合成cDNA第一链和第二链,双链cDNA修平末端后连上EcoRⅠ/HindⅢ接头,分别用EcoRⅠ/HindⅢ酶切消化后,反向连上载体pcDNA 3.1,连接产物转化大肠杆菌得一反义cDNA文库,随机挑取40个克隆子进行酶切鉴定。结果构建的反义cDNA文库含1×10~6重组子,重组效率为90%,插入子平均长度为1.5kb。结论构建的文库容量较大,质量较高,为进一步分离丁酸钠抗肿瘤效应基因奠定了基础。

关 键 词:脱噬作用  cDNA文库  丁酸钠
收稿时间:2005-09-30
修稿时间:2005年9月30日

Construction of an anti-sense cDNA library of MCF-7 cells during apoptosis induced by sodium butyrate and preliminary identification
XI Ling CHEN Gang WU Peng Cancer Biomedical Center,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan ,China.Construction of an anti-sense cDNA library of MCF-7 cells during apoptosis induced by sodium butyrate and preliminary identification[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2006,23(7):807-809.
Authors:XI Ling CHEN Gang WU Peng Cancer Biomedical Center  Tongji Hospital  Tongji Medical College  Huazhong University of Science and Technology  Wuhan  China
Institution:XI Ling CHEN Gang WU Peng Cancer Biomedical Center,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:Apoptosis  cDNA library  Sodium butyrate
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