| 基于直接标记法抗体微阵列的初步构建 |
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| 引用本文： | 王丽梅,刘必成,吕林莉,郑敏.基于直接标记法抗体微阵列的初步构建[J].东南大学学报(医学版),2009,28(2). |
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| 作者姓名： | 王丽梅 刘必成 吕林莉 郑敏 |
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| 作者单位： | 东南大学肾脏病研究所,附属中大医院,江苏,南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省自然科学基金重点项目，江苏省医学重点人才项目 |
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| 摘 要： | 目的:初步构建基于直接标记法的抗体微阵列,并评价其应用于临床的可能性. 方法:选择白蛋白作为目标蛋白,通过琼脂糖铺片、玻片活化、机器点样、点样后固定等步骤构建抗体微阵列,经封闭非特异位点、标记抗原、加样后对白蛋白进行检测,对关键步骤--抗原标记进行最佳条件摸索,通过对临床标本的检测评价其潜在应用价值.结果:应用BCA蛋白定量试剂盒测定尿液样本总蛋白浓度做出的标准曲线,其R2均大于0.99;温度为37 ℃时抗原标记效果最佳;标记后抗原存放1周对信号的影响无统计学意义(P＜0.01);本方法能够检测出临床检测为阴性的尿微量白蛋白浓度.结论:本研究构建了基于直接标记法的抗体微阵列,并对关键的抗原标记环节进行了最佳工作条件优化,有应用于临床检测的潜力.
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| 关 键 词： | 抗体微阵列 直接标记法 BCA蛋白定量 蛋白标记 |
Construction of an antibody microarray based on direct labeling strategy |
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| WANG Li-mei,LIU Bi-cheng,L Lin-li,ZHENG Min.Construction of an antibody microarray based on direct labeling strategy[J].Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed,2009,28(2). |
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| Authors: | WANG Li-mei LIU Bi-cheng L Lin-li ZHENG Min |
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| Institution: | Institute of Nephrology;Zhongda Hospital;Southeast University;Nanjing 210009;China |
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| Abstract: | Objective To build an antibody microarray based on direct labeling strategy and evaluate it's technical potentiality for clinical application.Methods Constructed antibody microarrays by preparation of array support,array fabrication,then undertook protein array assay and data analysis.Optimized the experimental condition of key procedure for labeling of samples.Urinary albumin excretion in the samples were detected by using of the fabricated protein array,which were compared to that detected with immunoturb... |
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| Keywords: | antibody microarray direct labeling BCA protein assay protein labeling |
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