| 基因Ⅳ型HEV ORF3真核表达质粒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 章述军,田德英,刘曦,贾昱娴.基因Ⅳ型HEV ORF3真核表达质粒的构建与鉴定[J].中国现代医学杂志,2010,20(1). |
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| 作者姓名： | 章述军 田德英 刘曦 贾昱娴 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济学院附属同济医院,感染科,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 湖北省科技攻关项目,湖北省武汉市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建基因Ⅳ型HEV ORF3的真核表达栽体.方法 从患者血清中提取HEW RNA,利用RT-PCK技术扩增HEV ORF3基因,EcoR Ⅰ/BamH Ⅰ双酶切后连接到经同样酶切的pEGFPC2真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒pEGFPC2-OPF3.将重组质粒用脂质体法转染HepG2细胞,Western blot分析鉴定EGFP-ORF3融合蛋白的表达.结果 真核表达质粒转染HepG2细胞,Western blot在39.8kD左右有一条强的棕色条带.结论 成功构建pEGFPC2-ORF3真核表达质粒,在HepG2细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | HEV 真核表达 绿色荧光蛋白 |
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