| 树突状细胞-肝癌细胞株HepG2融合细胞来源的exosome抗肝癌效应的实验研究 |
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| 引用本文： | 张红梅,张利旺,任军,白俊,刘文超. 树突状细胞-肝癌细胞株HepG2融合细胞来源的exosome抗肝癌效应的实验研究[J]. 现代肿瘤医学, 2006, 14(9): 1047-1051 |
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| 作者姓名： | 张红梅 张利旺 任军 白俊 刘文超 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院肿瘤科,陕西,西安,710032
2. 陕西省人民医院,陕西,西安,710068 |
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| 基金项目： | 2006年全军医药卫生科研基金(06MA205) |
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| 摘 要： | 目的:以肝癌(HCC)患者树突状细胞(DC)与肝癌细胞HepG2之融合细胞为来源制备exosome,检测其体外诱导同源T细胞产生特异性抗HepG2的免疫效应。方法:以HCC患者外周血单个核细胞(PBMC)为来源,应用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素-4(rhlL-4)体外诱导培养DC;聚乙二醇融合DC与肝癌细胞HepG2,免疫磁珠分选DC-HepG2融合细胞,以纯化的融合细胞上清为来源,超滤及超高速密度梯度离心法制备exosome;透射电镜观察exosome形态,流式细胞术、ELISA等方法检测exo-some蛋白分子表达;以融合细胞来源的exosome直接刺激效应淋巴细胞,MTT法检测效应淋巴细胞对靶细胞HepG2的杀伤活性;ELISA法检测该效应淋巴细胞分泌IFN-γ水平。结果:DC-HepG2融合细胞可分泌ex-osome,该exosome同时含有DC的特征分子CD86(94.6%)和肝癌细胞HepG2的AFP抗原(40.7%),ELISA法亦证实exosome提取物中含有AFP蛋白;DC-HepG2来源的exosome活化的淋巴细胞(Exo-L)对靶细胞HepG2的杀伤率明显高于单纯淋巴细胞组(L)(P<0.05),Exo-L组对HepG2的杀伤率亦显著高于对其他两种靶细胞(肝癌细胞SMMC7721、白血病细胞K562)的杀伤率(P<0.05)。靶细胞为HepG2时,Exo-L组IFN-γ分泌量明显高于L组(P<0.05)。结论:以肝癌患者DC与肝癌细胞HepG2之融合细胞为来源可制备获得exosome瘤苗,该瘤苗无须DC存在,可直接激活自体淋巴细胞,产生HepG2抗原特异CTL,显示了比传统制备的exosome更强的功能,有望成为HCC免疫治疗的有效途径。
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| 关 键 词： | exosome 树突状细胞 细胞融合 肝癌 免疫治疗 |
| 文章编号： | 1672-4992-（2006）09-1047-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-13 |
| 修稿时间： | 2006-06-13 |
Specific immune responses against hepatocellular carcinoma induced by dendritic cell -HepG2 fusion cells derived - exosomes |
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| ZHANG Hong-mei,ZHANG Li-wang,REN Jun,BAI Jun,LIU Wen-chao. Specific immune responses against hepatocellular carcinoma induced by dendritic cell -HepG2 fusion cells derived - exosomes[J]. Journal of Modern Oncology, 2006, 14(9): 1047-1051 |
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| Authors: | ZHANG Hong-mei ZHANG Li-wang REN Jun BAI Jun LIU Wen-chao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | exosome dendritic cell(DC) cell fusion hepatocellular carcinoma immunotherapy |
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