| 人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 常红,郭梦和,郭坤元,李永贺.人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立[J].第一军医大学学报,2004,24(7):805-808. |
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| 作者姓名： | 常红 郭梦和 郭坤元 李永贺 |
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| 作者单位： | [1]第一军医大学珠江医院耳鼻咽喉科，广东广州510282 [2]第一军医大学珠江医院血液科，广东广州510282 |
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| 摘 要： | 目的 亚克隆人神经营养因子-3(human neurotrophin-3，NT3)并转染至体外培养的人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)，建立能够表达和分泌NT3的基因工程细胞模型。方法 采用低糖DMEM培养液 10％胎牛血清体外培养BM-MSCs，流式细胞仪分析其表面标记；构建真核表达载体pcDNA3.1( )／NT3并通过脂质体介导转染BM-MSCs；收集部分细胞提取其中的总RNA，经逆转录PCR检测NT3基因表达；利用培养上清液体外孵育毛细胞以鉴定其生物学活性。结果 BM-MSCs表达CD13、CD29、CD59．不表达CD11、CD14、CD31、CD34、CD45、CD80、CD86、CD117、HLA-DR；pcDNA3．1( )／NT3转染BM-MSCs后，能够表达和分泌NT3，并具有生物学活性，可促进离体的豚鼠耳蜗毛细胞存活。结论 在体外建立表达NT3基因并分泌NT3的基因工程细胞是可行的。
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| 关 键 词： | 神经营养因子-3／分泌 骨髓间充质干细胞／遗传学 转染 |
Subcloning of human neurotrophin-3 gene and construction of its genetically engineered cell model] |
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| Hong Chang,Meng-he Guo,Kun-yuan Guo,Yong-he Li.Subcloning of human neurotrophin-3 gene and construction of its genetically engineered cell model][J].Journal of First Military Medical University,2004,24(7):805-808. |
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| Authors: | Hong Chang Meng-he Guo Kun-yuan Guo Yong-he Li |
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| Institution: | Department of Otolaryngology, Zhujiang Hospital, First Military Medical University, Guangzhou 510282, China. chang_hong_278@msn.com |
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