姜黄素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制研究

目的:探讨姜黄素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制。方法:选取SK-N-SH、SH-SY5Y细胞为研究对象,以不同浓度姜黄素(0、1.25、2.5、5、10、15μmol/L)作用于细胞,采用CCK-8法检测其增殖抑制率并计算半数抑制浓度(IC₅₀);并以1/2 IC₅₀姜黄素、IC₅₀姜黄素、2 IC₅₀姜黄素、NAC(5 mmol/L)、姜黄素+NAC(IC₅₀+5 mmol/L)作用于细胞,用CCK-8法检测抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡、ROS荧光强度;采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Grp78、CHOP、Beclin-1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ蛋白表达。结果:姜黄素以浓度依赖性抑制SK-N-SH、SH-SY5Y细胞的增殖,其IC₅₀分别为13.251、12.387μmol/L;与空白对照组比较,1/2 IC₅₀、IC₅₀、2 IC₅₀姜黄素组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞凋亡及ROS荧光强度显著升高,IC₅₀、2 IC₅₀姜黄素组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞Cleaved Caspase-3、Grp78、CHOP、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达显著升高,LC3Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与姜黄素组比较,姜黄素+NAC组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低,SK-N-SH细胞Grp78、CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:姜黄素能抑制SK-N-SH、SH-SY5Y细胞增殖,其机制可能与靶向ROS影响细胞内质网应激及自噬从而诱导细胞凋亡有关。