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小分子干扰RNA对子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6、E7mRNA表达的影响
引用本文:Wang P,Cui ZM,Luo B,Lin P. 小分子干扰RNA对子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6、E7mRNA表达的影响[J]. 中华妇产科杂志, 2006, 41(3): 190-193
作者姓名:Wang P  Cui ZM  Luo B  Lin P
作者单位:1. 266003,青岛大学医学院附属医院妇产科
2. 266003,青岛大学医学院附属医院微生物实验室
摘    要:目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)对宫颈癌细胞系HeLa细胞中人乳头状瘤病毒(HPV)18型E6、E7mRNA表达的干扰作用。方法采用体外转录方法合成HPV18E6、E7siRNA,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定HeLa细胞活性[以吸光度(A)值表示],筛选出最适宜转染浓度。通过阳离子脂质体将HPV18E6、E7siRNA转染入靶细胞HeLa细胞中。实验分为3组,E6转染组(转染HPV18E6siRNA),E7转染组(转染HPV18E7siRNA),设未转染细胞为对照组。RT-PCR技术分别检测转染24、48、72h后HeLa细胞中HPV18E6、E7mRNA的表达。流式细胞仪检测细胞周期。结果MTT比色法检测结果显示,HPV18E6、E7siRNA的最适宜转染浓度为20pmol/L,以此浓度HPV18E6、E7siRNA转染后,E6转染组细胞活性为0·57±0·05,E7转染组细胞活性为0·62±0·04,分别与对照组的0·87±0·05比较,差异有统计学意义(P<0·05)。E6转染组转染前HPV18E6mRNA表达水平为0·63±0·04,转染后24、48、72h,其表达水平分别为0·53±0·04、0·46±0·02、0·56±0·03;E7转染组转染前HPV18E7mRNA的表达水平为0·66±0·03,转染后分别为0·60±0·05、0·52±0·04、0·59±0·02,E6、E7转染组各转染时间点分别与其转染前比较,差异均有统计学意义(P<0·05)。E6转染组S期细胞比例最低为(0±5·5)%,G2期细胞最高为(66·9±3·5)%;E7转染组S期细胞比例最低为(5·6±4·2)%,G2期细胞最高为(47·2±0·5)%,E6、E7转染组各细胞周期分别与对照组[S期细胞为(39·4±0·4)%,G2期细胞为(1·4±1·2)%]比较,差异均有统计学意义(P<0·05)。结论宫颈癌HeLa细胞中存在RNA干扰现象,对外源性HPV18E6、E7siRNA的干扰具有特异性。

关 键 词:RNA  小分子干扰 癌基因蛋白质类  病毒性 宫颈肿瘤 HeLa细胞
收稿时间:2005-08-04
修稿时间:2005-08-04

Effect of small interference RNA on E6, E7 mRNA of human papillomavirus type-18 in cervical cancer cells
Wang Ping,Cui Zhu-mei,Luo Bing,Lin Ping. Effect of small interference RNA on E6, E7 mRNA of human papillomavirus type-18 in cervical cancer cells[J]. Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology, 2006, 41(3): 190-193
Authors:Wang Ping  Cui Zhu-mei  Luo Bing  Lin Ping
Affiliation:Department of Obstetrics and Gynecology, Afflicated Hospital of Medical College, Qingdao University, Qingdao 266003, China.
Abstract:
Keywords:BNA, small interfering   Oncogene protoeins, viral   Cervix neoplasms   HeLa cells
本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录!
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