| PKB的PH结构域在原核表达及其纯化和活性 |
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| 引用本文： | 施冬云,魏廉,黄伟达,刘珊林,徐伯赢,申宗侯. PKB的PH结构域在原核表达及其纯化和活性[J]. 复旦学报(医学版), 2002, 29(6): 423-427 |
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| 作者姓名： | 施冬云 魏廉 黄伟达 刘珊林 徐伯赢 申宗侯 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学医学院生化与分子生物学系,上海,200032
2. 复旦大学生命科学学院生化系,上海,200433 |
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| 基金项目： | 上海市教委重点科研项目 (B990 80 6 )，上海市自然科学基金 ( 0 2ZB14 0 19)资助 |
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| 摘 要： | 目的 利用原核系统表达原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶B(PKB)的PH结构域 ,为进一步研究其结构和功能奠定基础。方法 我们构建了PKB的PH结构域的表达质粒 ,在大肠杆菌中表达出PH结构域 ,并利用蛋白N端加入的组氨酸标签进行亲和层析及离子交换层析纯化蛋白。结果 在大肠杆菌中表达的PH结构域以包涵体形式存在 ,经变性和复性后成为具有天然构象的可溶性蛋白 ,经亲和层析和离子交换层析纯化的PH结构域具有与磷脂酰肌醇PI 4 ,5 P2 的结合能力 ,证明其具有生物学活性。结论 本方法成功表达纯化了PKB的PH结构域 ,可用作PH结构域结构和功能的进一步研究。
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| 关 键 词： | 丝苏氨酸蛋白激酶B PH结构域 原核表达 蛋白纯化 |
| 修稿时间： | 2002-04-27 |
Expression of the Pleckstrin Homology Domain of the Protein Kinase B in Prokaryotic System and Its Purification and Biological Assay |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein kinase B PH domain prokaryotic expression protein purification |
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