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携带入VEGF165的腺病毒载体的构建及鉴定
引用本文:王崇全,王家宁,黄永章,陈霞平,刘志祥,周芳.携带入VEGF165的腺病毒载体的构建及鉴定[J].临床检验杂志,2002,20(3):156-158.
作者姓名:王崇全  王家宁  黄永章  陈霞平  刘志祥  周芳
作者单位:1. 十堰市大和医院,心血管内科,湖北十堰,442000
2. 十堰市大和医院,生命科学研究所,湖北十堰,442000
摘    要:目的 构建携带人血管内皮生长因子 (VEGF) 16 5基因的重组腺病毒载体 ,用于治疗重症冠心病。方法 将人VEGF16 5cDNA正向插入到穿梭质粒 pHCMVSP1A的CMV启动子之下 ,构建重组质粒 ,即pAd hVEGF16 5 ,通过脂质体与pJM17共转染 2 93细胞 ,经同源重组获得携带人VEGF16 5基因的重组腺病毒载体Ad hVEGF16 5。通过PCR扩增法鉴别Ad hVEGF16 5 ,根据A2 60nm计算病毒滴度。结果 人VEGF16 5cDNA成功地正向插入到 pHCMVSP1A载体中 ,以重组病毒基因组DNA为模板 ,同时扩增出了 5 76bp的VEGF16 5cDNA基因片段和 86 0bp的腺病毒骨架基因片段 ,证实了Ad hVEGF16 5的正确性。测病毒滴度为 1.94× 10 12 pfu/ml。结论 携带人VEGF16 5的腺病毒载体的成功构建为用VEGF16 5基因治疗冠心病奠定了基础。

关 键 词:腺病毒载体  血管内皮生长因子  腺病毒  基因治疗  冠心病
文章编号:1001-764X(2002)03-0156-03
修稿时间:2001年9月30日

Construction and characterization of replication-deficient adenoviral vector coding for human vascular endothelial growth factor 165
WANG Chongquan,WANG Jianing,HUANG Yongzhang,et al..Construction and characterization of replication-deficient adenoviral vector coding for human vascular endothelial growth factor 165[J].Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,2002,20(3):156-158.
Authors:WANG Chongquan  WANG Jianing  HUANG Yongzhang  
Abstract:
Keywords:Vascular endothelial growth factor  Adenovirus  Gene therapy  
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