| 一氧化氮合酶基因转染小鼠内皮祖细胞的实验研究 |
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| 引用本文： | 党胜春,陈荣芳,王平江,冯舒,张建新. 一氧化氮合酶基因转染小鼠内皮祖细胞的实验研究[J]. 广东医学, 2014, 35(22) |
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| 作者姓名： | 党胜春 陈荣芳 王平江 冯舒 张建新 |
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| 作者单位： | 江苏大学附属医院普外科 江苏镇江212001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，江苏省自然科学基金资助项目，江苏省博士后科研资助计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨利用脂质体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因体外转染小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)的可行性.方法 密度梯度离心法分离ICR小鼠骨髓来源单个核细胞培养制备小鼠EPC并鉴定;构建、扩增、提取并纯化pcDNA3.0/eNOS基因质粒;用EPC培养基配成2×105·mL-1细胞悬液,按0.6 mL/孔重新铺6孔板,待细胞生长至80％左右融合时,用脂质体LipofectamineTM 2000体外转染eNOS基因至EPC.转染48 h后,采用RT-PCR检测EPC中eNOS的表达,硝酸还原酶法检测EPC中一氧化氮(NO)的含量,荧光探针DCFH-DA活性氧检测氧自由基(ROS)的含量.结果 成功培养EPC,成功构建pcDNA3.0/eNOS基因载体.转染48 h后,EPC中eNOS表达量明增加(P＜0.01),NO含量明显升高(P＜0.01),ROS含量明显降低.结论 脂质体介导eNOS基因能够有效转染小鼠EPC,并能在EPC中有效表达.
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| 关 键 词： | 内皮祖细胞 内皮型一氧化氮合酶基因 一氧化氮 氧自由基 |
Experimental study on endothelial nitric oxide synthase gene transfecting in murine endothelial progenitor cells |
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| DANG Sheng-chun,CHEN Rong-fang,WANG Ping-jiang,FENG Shu,ZHANG Jian-xin. Experimental study on endothelial nitric oxide synthase gene transfecting in murine endothelial progenitor cells[J]. Guangdong Medical Journal, 2014, 35(22) |
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| Authors: | DANG Sheng-chun CHEN Rong-fang WANG Ping-jiang FENG Shu ZHANG Jian-xin |
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| Keywords: | endothelial progenitor cells endothelial nitric oxide synthase gene nitric oxide reactive oxygen species |
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