| rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞 |
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| 引用本文： | 周小莹,暨明,刘君彦,谭孟群.rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞[J].中南大学学报(医学版),2007,32(5):742-746. |
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| 作者姓名： | 周小莹 暨明 刘君彦 谭孟群 |
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| 作者单位： | 中南大学基础医学院生理学系血液研究室,长沙,410078;上海复旦张江生物公司,上海,201203 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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教育部高等学校博士学科点专项科研基金
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湖南省卫生厅科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:在诱导人骨髓CD34 细胞分化成树突状细胞(dendritic cells,DCs)的基础上,探讨2型重组腺相关病毒(Type 2 recombinant adeno-associated virus,rAAV2)载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因转染DCs的条件.方法:采用免疫磁珠法分离纯化人骨髓来源的CD34 细胞.在含有IL-4和GM-CSF的培养体系中体外诱导CD34 细胞生成DCs,于第5天加入TNF-α诱导DCs成熟,在不同时间用rAAV2载体介导GFP基因转染未成熟和成熟的DCs.通过电子显微镜和流式细胞仪鉴定树突状细胞,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达.结果:人骨髓CD34 细胞经诱导分化后,在光镜及透射电镜下均可观察到DCs的形态特征,流式细胞仪检测到DCs表型;荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞培养第3天、第5天和加入TNF-α后的rAAV2-GFP转染率分别为0.45%,13.54%和0.25%.结论:本实验中所采用的培养体系可成功将人骨髓CD34 细胞诱导分化成DCs,rAAV2/GFP转染DCs效率随细胞诱导分化时间的延长而增高,且转染未成熟DCs的效率高于转染成熟DCs.
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| 关 键 词： | 重组腺相关病毒2型 GFP 树突状细胞 基因转导 |
| 文章编号： | 1672-7347(2007)05-0742-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-14 |
| 修稿时间： | 2006年11月14 |
GFP gene transfection of dendritic cells mediated byrecombinated adeno-associated virus |
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| ZHOU Xiao-ying,JI Ming,LIU Jun-yan,TAN Meng-qun.GFP gene transfection of dendritic cells mediated byrecombinated adeno-associated virus[J].Journal of Central South University (Medical Sciences)Journal of Central South University (Medical Sciences),2007,32(5):742-746. |
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| Authors: | ZHOU Xiao-ying JI Ming LIU Jun-yan TAN Meng-qun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adeno-associated virus green fluorescent protein dendritic cells gene transfection |
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