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| 一种L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒的构建及高效表达 | |
| 作者姓名： | 肖静 杨元好 吴永国 唐娟 |
| 作者单位： | 深圳市宝安区松岗人民医院检验科,广东深圳,518105 |
| 基金项目： | 基金项目：深圳市科技计划项目 |
| 摘 要： | 目的:拟通过构建人阴道毛滴虫的L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒,并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化表达产物,从而获得重组蛋氨酸裂解酶.方法:PCR法从人阴道毛滴虫的基因组中获得L-蛋氨酸γ-裂解酶获得L-蛋氨酸γ-裂解酶基因片段,并克隆至pGEX4T -2质粒,获得重组质粒,转化至大肠杆菌DH5α中,在异丙基-B-D-硫代半乳糖苷诱导下,实现高效表达,表达产物经亲和层析纯化获得重组L-蛋氨酸γ-裂解酶.结果:表达产物进行SDS - PAGE检测,结果表明在相对分子质量68000处出现高浓度的GST融合蛋白,相对分子质量与预期大小相符；薄层扫描显示重组蛋白占总菌量的33.6％.结论:人阴道毛滴虫的L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒构建成功,并成功地获得高效表达. |
| 关 键 词： | L-蛋氨酸γ-裂解酶 pGEX4T-2质粒 逆转录PCR 基因克隆 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |