|
|||||
|
|
| 大鼠代谢型谷氨酸受体1亚型基因片段的克隆及其在小脑的表达 | |
| 引用本文： | 袁芳,王忠诚,杨慧,张亚卓,高殿帅,蔡青,徐群渊. 大鼠代谢型谷氨酸受体1亚型基因片段的克隆及其在小脑的表达[J]. 中华神经外科杂志, 2003, 19(1): 43-46 |
| 作者姓名： | 袁芳 王忠诚 杨慧 张亚卓 高殿帅 蔡青 徐群渊 |
| 作者单位： | 1. 100050,北京市神经外科研究所;首都医科大学2000级博士研究生 2. 100050,北京市神经外科研究所 3. 首都医科大学神经科学研究所 4. 首都医科大学神经科学研究所;首都医科大学2000级博士研究生 |
| 基金项目： | 北京市科技新星计划资助项目 ( 9538130 0 ) |
| 摘 要： | 目的：克隆大鼠代谢型谷氨酸受体1亚型（mGluR1)基因特异片段，制备cDNA探针。方法：从Wistar大鼠小脑中提取总RNA，以RT－PCR方法得到预期的599bp条带，将这一片段克隆到pGEM-T easy载体上，经酶切鉴定正确后送测序。将重组质粒经限制性内切酶酶切制备成线性模板，通过体外转录的方法 合成地高辛标记的mGluR1cRNA正义及反义探针。取成年Wistar大鼠小脑组织进行原位杂交实验，以检测探针的可靠性。结果：测序证实用RT－PCR的方法获得了mGluR1基因特异片段，成功地构建了pGEM-TmGluR1重组质粒。根据斑点杂交实验结果计算出正义、反义探针浓度分别为10ng/μl及30ng/μl。原位杂交实验的结果显示，用mGluR1反义探针进行杂交的阳性信号主要分布在大鼠小脑蒲肯野氏细胞胞浆，用正义探针杂交无阳性信号。结论：本实验克隆了mGluR1基因特异片段，并制备了cRNA探针，并用大鼠小脑进行的原位杂交实验显示，此探针灵敏度高，特异性好。 |
| 关 键 词： | 大鼠 代谢型谷氨酸受体1 亚型基因片段 小脑 RT－PCR cRNA探针 基因克隆 原位杂交 基因表达 脑损伤 |
| 修稿时间： | 2002-12-02 |
Cloning of gene fragment of metabotropic glutamate receptor 1 and its expression in rat cerebellum |
|
| YUAN Fang,WANG Zhongcheng,YANG Hui,et al.. Cloning of gene fragment of metabotropic glutamate receptor 1 and its expression in rat cerebellum[J]. Chinese Journal of Neurosurgery, 2003, 19(1): 43-46 | |
| Authors: | YUAN Fang WANG Zhongcheng YANG Hui et al. |
| Affiliation: | YUAN Fang,WANG Zhongcheng,YANG Hui,et al. Beijing Neurosurgical Institute,Beijing 100050,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Metabotropic glutamate receptor 1 RT PCR cRNA probe In situ hybridization |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |