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人类免疫缺陷病毒-2 gag重组鸡痘病毒疫苗的构建及实验免疫研究
引用本文:张立树,金宁一,李子健,江文正,王宏,宋英今. 人类免疫缺陷病毒-2 gag重组鸡痘病毒疫苗的构建及实验免疫研究[J]. 中华传染病杂志, 2006, 24(4): 220-224
作者姓名:张立树  金宁一  李子健  江文正  王宏  宋英今
作者单位:1. 130062,长春,军事医学科学院军事兽医研究所,全军基因工程重点实验室
2. 北京大学第三医院血管医学研究所
3. 第二军医大学免疫学研究所
4. 暨南大学生命科学院生物系
5. 天津大学农业与生物工程学院
基金项目:国家“863”计划资助项目(2003AA219051),吉林省科技发展计划项目(20030550-1)
摘    要:目的构建并探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)-2 gag重组鸡痘病毒(FPV)在小鼠体内的免疫应答,为开发HIV-2基因重组活载体疫苗提供实验依据。方法将HIV-2结构基因gag插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游.构建出鸡痘病毒重组转移质粒pUTA2-gag;经转染和BrdU加压筛选,以基因组聚合酶链反应(PCR)和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌内注射免疫Balb/c小鼠,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清HIV-2抗体,流式细胞仪测定CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果构建出重组鸡痘病毒转移质粒pUTA2-gag;从重组病毒的基因组中可扩增出大小为766bp的目的基因,其表达产物可与人HIV-2阳性血清发生反应,目的蛋白的相对分子质量约为55000;重组病毒免疫组小鼠的血清出现HIV-2抗体.脾T细胞亚类的数量增加,并产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性。结论获得一株重组鸡痘病毒,该病毒可稳定表达HIV-2结构蛋白Gag,并能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答。

关 键 词:HIV-2  基因,gag  重组,遗传  鸡痘病毒  免疫,细胞  抗体生成
修稿时间:2005-06-13

Construction of HIV-2 gag recombinant fowlpox virus and its immune reactivity in mice
ZHANG Li-shu JIN Ning-yi LI Zi-jian.Key Laboratory of Genetic Engeneering of PLA,Military Veterinary Institute,Academy of Military Medical Sciences,Changchun ,China. Construction of HIV-2 gag recombinant fowlpox virus and its immune reactivity in mice[J]. Chinese Journal of Infectious Diseases, 2006, 24(4): 220-224
Authors:ZHANG Li-shu JIN Ning-yi LI Zi-jian.Key Laboratory of Genetic Engeneering of PLA  Military Veterinary Institute  Academy of Military Medical Sciences  Changchun   China
Affiliation:ZHANG Li-shu JIN Ning-yi LI Zi-jian.Key Laboratory of Genetic Engeneering of PLA,Military Veterinary Institute,Academy of Military Medical Sciences,Changchun 130062,China
Abstract:
Keywords:HIV-2  Genes  gag  Recobinantion  genetic  Fowlpox virus  Immunity  cellular  Antibody formation
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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