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恒河猴(Macaca mulatta)肝脏cDNA文库的构建
引用本文:秦胜芳,谭卫东,陈又南,丁杨,李胜富,李宏霞,王莉,杨戎,陆燕蓉.恒河猴(Macaca mulatta)肝脏cDNA文库的构建[J].四川大学学报(医学版),2007,38(3):378-381.
作者姓名:秦胜芳  谭卫东  陈又南  丁杨  李胜富  李宏霞  王莉  杨戎  陆燕蓉
作者单位:1. 重庆医科大学公共卫生学院,生殖生理教研室,重庆,400016
2. 四川大学华西医院,移植免疫实验室
3. 四川大学华西医院,国家成都中药安全性评价中心
基金项目:四川省科技厅平台建设项目 , 教育部长江学者和创新团队发展计划
摘    要:目的 构建正常恒河猴的肝脏组织cDNA表达文库,以筛选恒河猴的相关基因并提供其作为医学研究动物模型的遗传学依据.方法 提取正常恒河猴肝脏组织总RNA,纯化的mRNA反转录合成cDNA,连接EcoR Ⅰ接头,经XhoⅠ酶切并用CHROMA SPIN-400分离cDNA,将大于500 bp的cDNA片段连接于λ ZAP表达载体,体外包装后转染至XL1-Blue MRF'宿主菌中,再扩增文库.对cDNA文库的滴度、重组率和插入片段的大小进行检测.结果 初始文库的库容量为1.2×106 pfu,初始文库和扩增文库的滴度分别为1.1×106 pfu/mL、 7.7×109 pfu/mL,重组率分别为99.3%、98.2%,插入片段平均长度分别为2.0 kb、2.3 kb.结论 成功构建了恒河猴肝脏组织的cDNA表达文库,为同种和异种移植以及移植相关药物临床前研究奠定了良好的基础.

关 键 词:恒河猴  肝组织  cDNA文库  构建  恒河猴  Macaca  肝脏  文库  Rhesus  Monkey  Tissue  Liver  cDNA  Library  临床前研究  相关药物  异种移植  平均长度  库容量  结果  检测  大小  插入片段  重组率  滴度  宿主菌
收稿时间:2006-09-28
修稿时间:2006-12-04

Construction of a cDNA Library from Liver Tissue of Rhesus Monkey, Macaca mulatta
QIN Sheng-fang,TAN Wei-dong,CHEN You-nan,DING Yang,LI Sheng-fu,LI Hong-xia,WANG Li,YANG Rong,LU Yan-rong.Construction of a cDNA Library from Liver Tissue of Rhesus Monkey, Macaca mulatta[J].Journal of West China University of Medical Sciences,2007,38(3):378-381.
Authors:QIN Sheng-fang  TAN Wei-dong  CHEN You-nan  DING Yang  LI Sheng-fu  LI Hong-xia  WANG Li  YANG Rong  LU Yan-rong
Institution:Department of Genesiology and Physiology, College of Public Health, Chongqing University of Medical Science, Chongqing 400016, China.
Abstract:
Keywords:Rhesus monkey Liver tissue eDNA library Construction
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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