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HNF4α真核表达载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达
作者姓名:禹亚彬  杭化莲  卞建民
作者单位:南京医科大学附属南京医院普外科,江苏 南京 210006;南京医科大学附属南京医院普外科,江苏 南京 210006;南京医科大学附属南京医院普外科,江苏 南京 210006
基金项目:国家自然科学基金资助(81100306)
摘    要:目的:构建pcDNA3.1/HNF4α重组质粒,转染人脐带间充质干细胞 (human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs),并检测其在HUMSCs中的表达?方法:采用基因重组技术构建载体pcDNA3.1/HNF4α,经酶切和DNA测序鉴定,通过脂质体法转染HUMSCs后,进行RT-PCR和Western blot分析,免疫荧光检测转染后1周肝特异性生化指标?结果:成功构建真核表达质粒pcDNA3.1/HNF4α,转染人脐带间充质干细胞后,RT-PCR示转染后HNF4α mRNA表达,Western blot分析见HNF4α蛋白表达,免疫荧光示转染1周后HNF4α促进了HUMSCs向肝细胞方向分化?结论:成功构建真核表达载体,并在HUMSCs中正确表达,为进一步研究HNF4α在干细胞向肝细胞分化中作用提供了实验基础?

关 键 词:质粒构建   HNF4α   人脐带间充质干细胞   肝细胞分化
收稿时间:2012-04-19
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