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肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究
引用本文:Zhang GQ,Fang CH,Chi DZ. 肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究[J]. 中华外科杂志, 2005, 43(11): 716-720
作者姓名:Zhang GQ  Fang CH  Chi DZ
作者单位:1. 510028,广州,南方医科大学珠江医院肝胆外科
2. 510028,广州,南方医科大学珠江医院急诊外科
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(2001,010593,2002,020097)
摘    要:目的探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外是否可定向诱导分化为肝细胞及其方法。方法采用梯度离心法,分离纯化SD大鼠的MSCs,流式细胞仪检测和碱性磷酸酶染色鉴定细胞类型。根据培养基中肝细胞生长因子(HGF)浓度不同,将MSCs分为4组进行诱导分化:A组0 ng/ml,B组10ng/ml,C组20ng/ml,D组40ng/ml。倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化。于培养的1,3,7,14,21,28 d,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞免疫组化检测各组细胞甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)和白蛋白的基因和蛋白表达。结果分离纯化的SD大鼠MSCs的表面标志为CD29^ ,CD44^ ,CD34^-,CD45^-和CD90^ ,细胞的碱性磷酸酶染色阴性,细胞纯度达98%以上。C组与D组的MSCs,于培养第7天出现AFP基因表达,第14天表达增强,第28天表达减弱;第14天始出现白蛋白、CK18基因表达,而后持续。B组和A组在培养过程中,未出现AFP、CK18和白蛋白的表达。C组与D组MSCs的AFP细胞免疫组化染色培养第7天即出现阳性,第14天白蛋白和CK18免疫组化染色阳性。A组和B组的MSCs的AFP、白蛋白和CK18的免疫组化染色均阴性。结论成年大鼠MSCs在较高浓度的HGF的诱导下,可分化为肝细胞。

关 键 词:骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 实验研究 细胞分化 逆转录聚合酶链反应 免疫组化染色 MSCs 流式细胞仪检测 碱性磷酸酶染色 CK18 定向诱导分化 免疫组化检测 CD29^+ CD44^+ CD34^- 成年大鼠 SD大鼠 分离纯化 基因表达

Hepatocyte growth factor induces differentiation of adult rat mesenchymal stem cells into a hepatocyte lineage in vitro
Zhang Gang-qing,Fang Chi-hua,Chi Da-zhi. Hepatocyte growth factor induces differentiation of adult rat mesenchymal stem cells into a hepatocyte lineage in vitro[J]. Chinese Journal of Surgery, 2005, 43(11): 716-720
Authors:Zhang Gang-qing  Fang Chi-hua  Chi Da-zhi
Affiliation:Department of Hepatobiliary Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510028, China.
Abstract:
Keywords:Cell differentiation  Hepatocyte growth factor  Mesenchymal stem cells  Hepatocytes
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 PubMed 等数据库收录!
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