一种体内实时观察黑色素瘤的斑马鱼模型

目的建立一种在体内实时观察黑色素瘤发生发展的斑马鱼模型,为黑色素瘤的相关研究提供一个便捷的活体模型。方法构建红色荧光蛋白标记的黑色素瘤表达系统p MITFa1-Red V12/h Ras,利用小鼠B16黑色素细胞验证其表达效果。再将p MITFa1-Red V12/h Ras载体导入1-细胞期的斑马鱼受精卵中,采用活体成像系统实时观察黑色素瘤在斑马鱼体内的形成过程。结果 p MITFa1-Red V12/h Ras载体在B16细胞中成功表达。显微注射p MITFa1-Red V12/h Ras载体到1-cell期的斑马鱼受精卵3 d后,在荧光显微镜下观察到荧光标记的黑色素瘤;8周后,肉眼可以明显观察到黑色素瘤。黑色瘤的成瘤率达100%。p MITFa1-Red V12/h Ras载体被显微注射到TG(zlyz:EGFP)转基因斑马鱼的受精卵中后,在活体成像系统下清晰地观察到红色荧光标记的黑色素瘤细胞与绿色荧光标记的巨噬细胞的相互作用。结论成功构建了经济简便、易操作的在体内实时观察黑色素瘤的斑马鱼模型。