嵌合有HCV多中和抗原表位的乙肝S抗原病毒样颗粒的制备与鉴定 Preparation and identification of virus-like particle expressing chimerized HBV S antigen with HCV multi-neutralizing epitopes期刊界 All Journals 搜尽天下杂志传播学术成果专业期刊搜索期刊信息化学术搜索

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嵌合有HCV多中和抗原表位的乙肝S抗原病毒样颗粒的制备与鉴定

作者单位：	;1.第四军医大学唐都医院临床实验与检验科;2.第四军医大学实验动物中心;3.第四军医大学基础部微生物学教研室

摘要：	制备嵌合HCV多中和表位及HCV包膜蛋白E2的HBV S抗原病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),并进行鉴定、纯化和浓缩。HEK293T细胞用DMEM培养至90%密度时,将构建的重组真核表达载体pCI-MEpS、pCI-E2S用脂质体法转染HEK293T细胞,48h后在培养上清中得到自我装配的嵌合HCV多中和表位及包膜蛋白E2的HBV病毒样颗粒(VLP-MEpS,VLP-M2S)。蔗糖密度梯度离心,透析浓缩后,电化学发光法进行HBsAg定量测定、电镜分析和Western blotting鉴定。制备出的嵌合病毒样颗粒VLP-MEpS和VLP-E2S经浓缩后其HBsAg定量最高达到3×10~4 ng/mL。实验表明我们成功制备出嵌合有HCV多中和抗原表位的HBV VLP,为进一步分析诱导的中和抗体研究奠定基础。
关键词：	丙型肝炎病毒中和表位病毒样颗粒制备
Preparation and identification of virus-like particle expressing chimerized HBV S antigen with HCV multi-neutralizing epitopes

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