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人midkine基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定
引用本文:徐莹莹,张勇,刘云鹏.人midkine基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定[J].中国医科大学学报,2009,38(1).
作者姓名:徐莹莹  张勇  刘云鹏
作者单位:中国医科大学附属第一医院肿瘤内科,沈阳,110001
摘    要:目的 构建人中期因子(MDK)基因重组逆转录病毒载体,转染人胃癌SGC7901细胞株,为探讨MDK的生物学功能奠定基础.方法 扩增人MDK编码序列基因片段,经限制性内切酶酶切后将目的 片段插入pLXSN逆转录病毒载体.经酶切及测序鉴定后与pVSVG共转染GP293包装细胞,收集病毒上清感染人胃癌SGC7901细胞,G418筛选获得阳性细胞株.,结果酶切及DNA测序证实MDK基因重组逆转录病毒载体构建正确.病毒上清感染SGC7901细胞,G418筛选出阳性克隆,经实时定量PCR及Western blot检测发现SGC7901细胞中MDK mRNA及蛋白表达水平明显上调.结论 成功构建了高表达MDK的SGC7901细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础.

关 键 词:中期因子  逆转录病毒载体  转染

Construction and Identification of Recombinant Retroviral Vector of Human midkine Gene
XU Ying-ying,ZHANG Yong,LIU Yun-peng.Construction and Identification of Recombinant Retroviral Vector of Human midkine Gene[J].Journal of China Medical University,2009,38(1).
Authors:XU Ying-ying  ZHANG Yong  LIU Yun-peng
Abstract:
Keywords:
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