| 小鼠MIP1-α重组腺病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 贾凤岐,王维锋,江小玲,杨庆,卫立辛,杨广顺,吴孟超. 小鼠MIP1-α重组腺病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达[J]. 第二军医大学学报, 2002, 23(5): 494-497 |
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| 作者姓名： | 贾凤岐 王维锋 江小玲 杨庆 卫立辛 杨广顺 吴孟超 |
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| 作者单位： | 第二军医大学东方肝胆外科医院肿瘤免疫与基因治疗中心,上海,200438 |
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| 基金项目： | 上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划基金项目 (3 119975 0 3 0 2 10 40 3 ) |
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| 摘 要： | 目的:构建小鼠趋化因子MIP1-α(mMIP1-α)的重组腺病毒载体并在小鼠肝癌细胞中表达,为肝癌基因治疗提供实验基础.方法:PCR扩增含有mMIP1-α的质粒,将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及线性化的重组穿梭质粒pTrack-CMV- mMIP1-α共转化BJ5183受体菌并在其中发生同源重组,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子,重组腺病毒质粒经过293细胞的包装、扩增和纯化后,感染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6,一步法提取细胞总RNA,RT-PCR检测mMIP1-α的mRNA.琼脂糖凝胶打孔法体外观察感染上清中mMIP1-α对小鼠脾细胞的趋化活性.结果:得到了携带mMIP1-α的重组腺病毒,纯化后滴度为4×1011 efu/ml,在感染后的Hepa1-6细胞中检测到mMIP1-α的表达,上清中mMIP1-α的趋化指数为6.3.结论:成功地构建了携带mMIP1-α的重组腺病毒载体,为下一步应用于肝癌的基因治疗提供了基础.
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| 关 键 词： | 肝肿瘤、MIP1-α、腺病毒载体、细菌同源重组系统 |
| 文章编号： | 0258-879X(2002)05-0494-04 |
| 修稿时间： | 2001-11-20 |
Construction of adenoviral vector carrying murine MIP1-α and its expression in hepatocellular carcinoma |
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| JIA Feng Qi,WANG Wei Feng,JIANG Xiao Ling,YANG Qing,WEI Li Xin,YANG Guang Shun,WU Meng Chao. Construction of adenoviral vector carrying murine MIP1-α and its expression in hepatocellular carcinoma[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2002, 23(5): 494-497 |
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| Authors: | JIA Feng Qi WANG Wei Feng JIANG Xiao Ling YANG Qing WEI Li Xin YANG Guang Shun WU Meng Chao |
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