胎球蛋白–A调控糖尿病肾病 足细胞损伤机制研究

目的 研究胎球蛋白–A（fetoglobulin–a，Fetuin–A）调控糖尿病肾病足细胞的损伤机制。方法 选取健康SD成年大鼠5只，获取大鼠肾小球基膜（glomerular basement membrane，GBM）足细胞，分为上调Fetuin–A组、下调Fetuin–A组。采用反转录–聚合酶链反应（real time polymerase chain reaction，RT–PCR）技术检测Fetuin–A、足细胞表达，观察细胞增殖、凋亡，免疫组化法检测肾组织肿瘤坏死因子–α（tumor necrosis factorα，TNF–α）、混合系列蛋白激酶结构域蛋白（mixed–lineage kinase domain–like protein，MLKL）、受体相互作用蛋白激酶1（receptor–interacting protein kinase 1，RIPK1）水平，蛋白质印迹（Western blot，WB）法检测Wilms瘤基因1（wilms,tumor gene 1，WT1）、特异蛋白1（specific protein 1，Sp1）表达水平。结果 与对照组比较，下调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光度值、细胞凋亡率均较低，WT1、Sp1表达水平较高；上调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光密度值、细胞凋亡率均较高，WT1、Sp1表达水平较低（P<0.05）；与下调Fetuin–A组比较，上调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光度值、细胞凋亡率较高，WT1、Sp1表达水平较低（P<0.05）。结论 Fetuin–A靶向作用于Sp1抑制足细胞生长失常。