| 人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选 |
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| 引用本文： | 张建琼,张雪萍,谢维,林陵,单祥年,王琰.人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选[J].细胞与分子免疫学杂志,2000,16(3):189-192. |
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| 作者姓名： | 张建琼 张雪萍 谢维 林陵 单祥年 王琰 |
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| 作者单位： | 1. 南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室,江苏南京,210009
2. 北京海军总医院 |
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| 基金项目： | 江苏省科技发展基金资助!No.BJ97070 |
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| 摘 要： | 目的 构建人丙型肝炎病毒 (HCV)特异性噬菌体抗体库 ,制备人源抗HCV单克隆抗体 (mAb)。方法 用常规RT PCR法 ,直接从 5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中 ,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因 ,与噬菌体载体pComb3连接 ,构建噬菌体抗体Fab库。对抗体库进行 5轮吸附 -洗脱 -扩增的亲和选择后 ,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体。结果 RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因 ,并以此构建成容量为 1 2× 10 7的噬菌体抗体库。经 5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集 ,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达 96 %。结论 抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备 ,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具
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| 关 键 词： | 噬菌体抗体库 HCV 人源单克隆抗体 |
Construction and screening of human hepatitis C virus-specific phage antibody combinatorial library |
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| ZHANG Jian-qiong,ZHANG Xue-ping,XIE Wei,LIN Ling,SHAN Xiang-nian,WANG Yan.Construction and screening of human hepatitis C virus-specific phage antibody combinatorial library[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2000,16(3):189-192. |
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| Authors: | ZHANG Jian-qiong ZHANG Xue-ping XIE Wei LIN Ling SHAN Xiang-nian WANG Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phage antibody library HCV human monoclonal antibody |
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