异烟肼对肝细胞CYP2E1和GSTP1表达的影响

目的 探讨异烟肼(INH)诱导的人正常肝细胞中组蛋白乙酰化水平变化对CYP2E1、GSTP1表达的影响.方法 将人正常肝细胞HL-7702分为对照组、INH组、INH+Garcinol组、Garcinol组、INH+TSA组、TSA组;培养3h后收获细胞和上清液.采用比色法检测细胞培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测CYP2E1、GSTP1及下游凋亡指标JNK、Bax及抗凋亡指标Bcl2的mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肝细胞HAT和去乙酰化酶HDAC活性及CYP2E1、GSTP1蛋白含量.结果 与对照组相比,INH组HAT活性降低,HDAC活性增加,CYP2E1mRNA及蛋白表达增加,GSTP1 mRNA及蛋白表达降低,凋亡指标JNK、Bax mRNA增加,抗凋亡指标Bcl2mRNA降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与INH组比较,加入Garcinol后,HAT活性降低,CYP2E1、GSTP1 mRNA及蛋白表达亦降低;加入TSA后则相反,HDAC活性降低,CYP2E1、GSTP1 mRNA及蛋白表达均增加;同时,2个抑制剂组的JNK、Bax mRNA表达减少,Bcl2 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 INH能诱导人正常肝细胞乙酰化水平改变进而影响CYP2E1、GSTP1表达.