载脂蛋白E启动子区域-427T/C多态性与冠心病的关系及其对转录活性的影响

摘要：目的探讨载脂蛋白E（APOE）启动子区域-427T/C基因多态性与冠心病（CHD）发病的关系及其对APOE转录活性的影响。方法选取2016年10月—2017年9月在天津市胸科医院心内科住院的患者627例，分为CHD组415例，非CHD组212例。入院后检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、脂蛋白a［Lp（a）］、载脂蛋白AI（APOAI）、载脂蛋白B（APOB）、尿酸（UA）水平；应用酶联免疫吸附法 （ELISA）测定血清APOE浓度；聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测-427T/C位点基因多态性，比较2组内TC+CC型和TT型患者血脂及载脂蛋白水平的差异；Logistic回归分析影响冠心病发病的危险因素。利用双荧光素酶报告基因表达载体pGL2构建携带APOE-427TT野生型重组质粒（TT组）、APOE/-427CC变异纯合型重组质粒（CC组），通过阳离子脂质体法将TT组、CC组、pGL2-Basic空载体质粒（对照组）分别和pRL-CMV内参质粒共转染至293T细胞内，检测3组细胞荧光素酶报告基因的荧光强度，以反映APOE的转录活性。结果（1）与非CHD组相比，CHD组的年龄、男性比例、吸烟比例、有糖尿病史、TG、Lp（a）、HCY、UA均出现升高，APOAI、HDL-C水平则降低，差异均有统计学意义（P＜0.01）。2组基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡（χ2=1.698，P＞0.05）， CHD组C等位基因频率较非CHD组增高（19.8% vs. 12.4%，χ2=8.959，P＜0.05）。（2）CHD组中TC+CC型患者APOB高 于TT组，APOA/B低于TT组（P＜0.05），非CHD组2种基因型间血脂及载脂蛋白水平差异无统计学意义（P＞0.05）。 多元Logistic回归分析结果表明，吸烟（OR=2.065，95%CI：1.369~3.115）、糖尿病（OR=3.355，95%CI：1.935~5.815）、UA升高（OR=1.008，95%CI：1.005~1.010）、携带APOE-427 C等位基因（OR=1.876，95%CI：1.185~2.969）是CHD发生的危险因素。（3）体外实验结果显示，CC组APOE转录活性明显低于TT组（P＜0.05）。结论APOE-427 C等位基因携带者是冠心病发病的危险因素，该位点通过影响APOE的转录活性及合成水平，进而影响血浆脂蛋白浓度及冠心病的发病。