| 基于双荧光素酶报告基因系统的人源SREBP1基因启动子的活性研究 |
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| 引用本文： | 杨念,李琛,李洪亮,郑燕,房树华,汪选斌,赵雅玮.基于双荧光素酶报告基因系统的人源SREBP1基因启动子的活性研究[J].天津医药,2019,47(9):897. |
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| 作者姓名： | 杨念 李琛 李洪亮 郑燕 房树华 汪选斌 赵雅玮 |
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| 作者单位： | 项目基金：国家自然科学基金面上项目（81874356）；湖北省卫健委重点项目（WJ2017Z023）；湖北医药学院自由探索基金资助
（2018YHKT01）；湖北省卫健委中医药科研青年人才项目（ZY2019Q004）
作者单位：1江苏大学附属句容医院药剂科（邮编212000）；2湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心中药药理实验室，生物医药研究院，武
当特色中药研究湖北省重点实验室；3镇江市第一人民医院
作者简介：杨念（1991），女，硕士，药师，主要从事药理学研究
△通讯作者 汪选斌 E-mail：wangxb@hbmu.edu.cn；赵雅玮 E-mail：1241579758@qq.com |
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| 摘 要： | 目的 构建固醇调节元件结合蛋白 1（SREBP1）启动子双荧光素酶报告基因表达载体，为研究针对
SREBP1靶点的天然活性抑制剂筛选奠定基础。方法 利用生物信息学软件，对SREBP1基因5′端上游5 000 bp序
列进行启动子预测与分析。应用 Gibson Assembly 方法构建启动子双荧光素酶载体，并将构建成功的 pGL3-
SREBP1-pro重组质粒和内参质粒pRL-SV40共转染肝癌HepG2细胞并给予天然抑制剂大黄素，检测SREBP1转录活
性的抑制效果。结果 SREBP1基因5′端上游2 000 bp区域内有启动子特征序列，存在转录因子结合位点；重组质粒
经酶切及测序鉴定证实为阳性克隆，瞬时转染肝癌HepG2细胞后经双荧光素酶报告基因系统检测，所克隆的片段序
列具有启动子活性，该活性可被大黄素所抑制。结论 成功构建了pGL3-SREBP1-pro双荧光素酶报告基因表达载
体，并证实其活性，可为进一步用于针对SREBP1靶点的天然活性抑制剂筛选奠定
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| 关 键 词： | 固醇调节元件结合蛋白1 转录启动子 基因 报告 萤光素酶类 大黄素 蒽醌类 生物信息学 |
Study on the activity of human SREBP1 promoter based on dual luciferase reporter system |
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| YANG Nian,LI Chen,LI Hong-liang,ZHENG Yan,FANG Shu-hua,WANG Xuan-bin,ZHAO Ya-wei.Study on the activity of human SREBP1 promoter based on dual luciferase reporter system[J].Tianjin Medical Journal,2019,47(9):897. |
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| Authors: | YANG Nian LI Chen LI Hong-liang ZHENG Yan FANG Shu-hua WANG Xuan-bin ZHAO Ya-wei |
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| Institution: | 1 Department of Pharmacy, Jurong Hospital Affiliated to Jiangsu University, Zhenjiang 212000, China;
2 Laboratory of Chinese Herbal Pharmacology, Oncology Center, Renmin Hospital, Biomedical
Research Institute, Hubei Key Laboratory of Wudang Local Chinese Medicine Research,
Hubei University of Medicine; 3 Zhenjiang First People’s Hospital |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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