| 异柠檬酸裂解酶的制备及其抑制剂筛选模型的建立 |
| |
| 引用本文： | 王晻,郝雪秦,高鹏,杨延辉,肖春玲. 异柠檬酸裂解酶的制备及其抑制剂筛选模型的建立[J]. 中国抗生素杂志, 2009, 34(8) |
| |
| 作者姓名： | 王晻 郝雪秦 高鹏 杨延辉 肖春玲 |
| |
| 作者单位： | 中国医学科学院,中国协和医科大学医药生物技术研究所重点室,北京,100050 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家传染病防治重大科技专项 |
| |
| 摘 要： | 目的 制备结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶(isocitrate lyase,ICL)并建立ICL抑制剂筛选模型.方法 通过四步层析法或金属螯合层析法纯化大肠埃希菌BL21(DE3)表达的ICL,并以异柠檬酸为底物,用纯化的ICL裂解舁柠檬酸,生成乙醛酸可与苯肼反应生成苯腙,苯腙在324nm波长下产生光吸收峰,测定酶促反应体系在324nm波长下光吸收检测异柠檬酸裂解酶的活性,根据待测样品对酶活性的抑制程度,筛选异柠檬酸裂解酶抑制剂.结果 用金属螯和层析法得到纯度为90%、比活力为2.8U/mg的ICL,建立并优化ICL抑制剂筛选模型,模型的信噪比(S/N)远大于3,变异系数(CV)远小于10%.结论 通过金属螯合层析法获得了特异性高、稳定性好的ICL抑制剂筛选模型,该模型可有效的应用于异柠檬酸裂解酶抑制剂的高通量筛选.
|
| 关 键 词： | 柠檬酸裂解酶 筛选模型 异柠檬酸裂解酶抑制剂 高通镀筛选 |
Preparation of isocitrate lyase versus etablishment of a drug screening model for isocitrate lyase inhibitors |
| |
| Wang Yang,Hao Xue-qin,Gao Peng,Yang Yan-hui,Xiao Chun-ling. Preparation of isocitrate lyase versus etablishment of a drug screening model for isocitrate lyase inhibitors[J]. Chinese Journal of Antibiotics, 2009, 34(8) |
| |
| Authors: | Wang Yang Hao Xue-qin Gao Peng Yang Yan-hui Xiao Chun-ling |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
