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实时荧光定量测定人B细胞激活因子受体基因表达水平
引用本文:鞠少卿,张冬雷,倪红兵,王跃国,苏建友,施健,王惠民,孔宪涛,仲人前.实时荧光定量测定人B细胞激活因子受体基因表达水平[J].中华检验医学杂志,2005,28(3):299-301.
作者姓名:鞠少卿  张冬雷  倪红兵  王跃国  苏建友  施健  王惠民  孔宪涛  仲人前
作者单位:1. 200003,上海,第二军医大学长征医院实验诊断科全军临床免疫中心
2. 南通大学附属医院酶学研究室
3. 南通大学检验医学中心
基金项目:国家自然科学基金项目 (30080027 ),上海市基础研究重大项目(02JC14005),上海市重大科技攻关项目(04DZ19116)
摘    要:目的研究建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子受体(BAFF-R)含量的方法,及探讨其在外周血单个核细胞(PBMC)中BAFF-R mRNA表达的检测价值。方法在BAFF-R基因高保守区设计特异性引物和荧光探针,用逆转录(RT -PCR)扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BAFF-R mRNA含量,并以BAFF-R mRNA和β2M mRNA含量的比值进行BAFF-R表达水平评价。结果RFQ-PCR检测BAFF-R含量的线性范围为10^9~10^1pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为12.5%和11.9%,高浓度样本批内和批间CV分别为8.3%和9.3%。30名健康献血员样本的PBMC中,83%(25/30)有BAFF-R mRNA表达,范围为0.14~1.03。结论RFQ-PCR检测BAFF-R mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性。

关 键 词:实时荧光定量  含量  B细胞  表达水平  mRNA表达  PBMC  激活因子  PCR)  荧光探针  R基因
修稿时间:2004年7月19日

Measurement of the expression level of B lymphocyte stimulator receptor(BAFF-R) by real-time fluorenscence quantitative method
JU Shao-qing,ZHANG Dong-lei,NI Hong-bing,WANG Yue-guo,SU Jian-you,SHI Jian,WANG Hui-min,KONG Xian-tao,ZHONG Ren-qian.Measurement of the expression level of B lymphocyte stimulator receptor(BAFF-R) by real-time fluorenscence quantitative method[J].Chinese Journal of Laboratory Medicine,2005,28(3):299-301.
Authors:JU Shao-qing  ZHANG Dong-lei  NI Hong-bing  WANG Yue-guo  SU Jian-you  SHI Jian  WANG Hui-min  KONG Xian-tao  ZHONG Ren-qian
Abstract:
Keywords:B lymphocyte stimulator  Peripheral mononuclear cell  Gene expression
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