HPV16E7基因克隆及其特异性鉴定

根据已报导的ＨＰＶ１６Ｅ７基因序列，设计了两个寡核苷酸引物，在引物的５’端分别引入了ＥｃｏＲＩ和Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切位点，采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增了ＨＰＶ１６Ｅ７基因片段。通过ＥｃｏＲＩ和Ｈｉｎｄ Ⅲ双酶切位点与ｐＵＣ１８载体连接，重组质粒转化宿主菌ＪＭ１０９，在含Ｘ－ｇａｌ、ＩＰＴＧ的平板上直接筛选，斑点杂交，ＰＣＲ扩增鉴定和酶切分析证明得到了含ＨＰＶ１６Ｅ７完整的编码序列的重组克隆。